有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究.pdf

1、研究目的:
　　本課題選用阻塞性黃疸模型小鼠為實驗對象，以黑果枸杞多糖或有氧運動的干預方式，探討NF-κB信號通路在小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的機理及闡述運動聯(lián)合黑果枸杞多糖改善肝損傷的效果，為阻塞性黃疸的輔助療法提供一種新的可行性實驗基礎和新的理論方向。
　　研究方法:
　　50只KM小鼠隨機分為5組:假手術組10只(B組）、模型組10只(M組）、枸杞組10只（G組）、有氧運動組10只（Y組）、枸杞+運動組10只（G+Y

2、組）。其中除假手術組外都以總膽管懸掛至腹壁48小時構建小鼠阻塞性黃疸的模型。枸杞組、枸杞+運動組小鼠于膽總管結扎術后2天進行黑果枸杞多糖灌胃，每天固定時間點，劑量為0.3 ml/次進行灌胃1次，共6W。有氧運動組、枸杞+運動組小鼠進行坡度為0％、速度為10m/min無負重訓練，每天30min、每周不連續(xù)訓練6天、保持6周的跑臺的運動方案。干預結束后小鼠取材前一天晚上禁食處理，取材前先進行稱重，麻醉完全后分離出肝臟組織，應用蘇木精-伊紅染

3、色對比小鼠肝臟組織形態(tài)及結構的病理改變;免疫組化法檢測肝臟組織NF-κB P65、NF-α的表達;Realtime-PCR技術檢測肝組織中核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IκB激酶IKK-α，NF-κB的抑制蛋白IκB-α表達;血液生化檢測血清總膽紅素(TBIL)、谷丙轉氨酶(ALT)和谷草轉氨酶(AST)的含量。
　　研究結果:
　　1.血清學結果:枸杞+運動組TBIL、ALT、AST含量較模型組顯著降低(P＜0.0

4、1)，枸杞組、有氧運動組的含量較模型組也有所下降(P＜0.05)。
　　2.HE染色顯示:假手術組小鼠肝細胞索呈放射狀排列;模型組小鼠的肝細胞發(fā)生萎縮，肝索斷裂，核固縮等，間質可見紅細胞堆積;有氧運動組、枸杞組可見肝小葉結構不規(guī)則，肝索排列欠整齊，局部可見變性的脂肪細胞;枸杞+運動組效果最為顯著，肝小葉完整，無變形及壞死現象。
　　3.免疫組織化學結果顯示: NF-κB P65、TNF-α在假手術組小鼠肝組織中幾乎不表達較模

5、型組顯著性降低(P＜0.01）;枸杞+運動組較枸杞組、有氧運動組、枸杞+運動組低(P＜0.01）。
　　4.Real-time PCR結果顯示:三個干預組與模型組比較，NF-κB、TNF-α、IKK-α mRNA表達明顯增加(P＜0.01），枸杞+運動組表達量高與枸杞組和有氧運動組(P＜0.01)，IκB-α的表達成相反趨勢。TNF-α和NF-kBP65的表達成正相關，和Iκ B-α的表達成負相關。
　　結論:
　　1