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文檔簡介
1、目的:
試圖通過檢測MiR-21和STAT3及P-STAT3在肺腺癌組織中以及發(fā)生、發(fā)展過程中的動態(tài)表達狀況,分析比較與正常肺組織,癌旁組織中表達的差異性,探討MiR-21、STAT3的異常表達對肺腺癌發(fā)生過程的影響,為臨床上進一步防治肺腺癌提供理論依據(jù)。
方法:
進行實驗的所有標本來自于新鄉(xiāng)市三家知名醫(yī)院的檢驗病理科,包括解放軍第371中心醫(yī)院檢驗病理科、新鄉(xiāng)醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院檢驗病理科、新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院檢
2、驗病理科。標本年限為2012年7月到2015年7月之間,其中實驗所用標本包括18例正常肺組織、69例肺腺癌組織和其癌旁組織(癌組織以外2-5cm),其中轉移癌51例。正常肺組織、腺癌組織和其癌旁組織、轉移癌組織均經過病理診斷(手術前經過化學治療的肺腺癌患者和復發(fā)的肺腺癌患者的病理標本均排除在外)。取得的各不同類型組織均為手術切除的新鮮組織標本,術后置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩H缓蟛捎胵RT-PCR方法檢測MiR-21及STAT3基因在各
3、種不同類型組織中的表達情況,免疫印跡Westernblot方法檢測p-STAT3蛋白在各種不同類型組織中的表達情況。采用SPSS17.0軟件包對實驗結果進行檢驗及單因素方差分析等相關統(tǒng)計分析。
結果:
1.常規(guī)病理診斷:經病理確診18例正常肺組織;69例肺腺癌組織(包括高分化29例、中分化18例、低分化22例)和其癌旁組織69例,其中發(fā)生淋巴結轉移癌51例。
2.MiR-21的表達qRT-PCR方法檢測得到
4、MiR-21在各種不同組織中的表達結果:正常肺組織為0.0017±0.001;癌旁組織為0.0180±0.005;腺癌組織為0.0990±0.035;轉移癌組織為0.1270±0.135。各組內之間基因的表達均具有顯著性差異(P<0.05),正常肺組織與肺腺癌組織相比具有極顯著性差異(P<0.01)。MiRNA-21基因在正常肺組織中呈現(xiàn)最低表達,癌旁組織中有所升高,肺腺癌組織中呈現(xiàn)高表達,轉移癌組織中較肺腺癌中表達的更高。
5、3.STAT3基因表達qRT-PCR方法檢測得到STAT3基因在各種不同組織中的表達結果:正常肺組織為0.318±0.015;癌旁組織為0.629±0.020;肺腺癌組織為1.047±0.041;轉移癌組織為1.236±0.016。各組內之間基因的表達均具有顯著性差異(P<0.05),正常肺組織與肺腺癌組織相比具有極顯著性差異(P<0.01)。STAT3基因在正常肺組織中呈現(xiàn)最低表達,癌旁組織中有所升高,肺腺癌組織中呈現(xiàn)高表達,轉移癌組
6、織中較肺腺癌組織中表達的更高。
4.p-STAT3蛋白的表達蛋白免疫印記技術Westernblot方法檢測得到p-STAT3蛋白在各種不同組織中的表達結果:正常肺組織中為1.00±0.76,肺腺癌旁組織中為2.00±1.23,肺腺癌組織中為3.86±1.24,肺轉移癌組織中為4.16±0.95。各組內之間蛋白的表達均具有顯著性差異(P<0.05),正常肺組織與肺腺癌組織相比具有極顯著性差異(P<0.01)。p-STAT3蛋白在
7、正常肺組織中呈現(xiàn)最低表達,癌旁組織中有所升高,肺腺癌組織中呈現(xiàn)高表達,轉移癌組織中較肺腺癌組織中表達的更高。
5.MiR-21與STAT3基因和p-STAT3蛋白之間的相關性運用統(tǒng)計學分析顯示,
在肺腺癌組中,MiR-21和STAT3二者之間呈現(xiàn)正相關性(r=-0.910,P<0.01);MiR-21和p-STAT3蛋白二者之間也呈現(xiàn)正相關性(r=-0.953,P<0.01);STAT3和p-STAT3之間存在一致性
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