miRNA-181a在人肺腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及對細(xì)胞功能的影響.pdf

1、目的：研究 miRNA-181a在人肺腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及轉(zhuǎn)染人肺腺癌耐藥細(xì)胞A549/DDP后對細(xì)胞功能的影響。
　　方法：利用實時熒光定量PCR方法檢測miRNA-181a在人正常胚肺細(xì)胞系HELF、人肺腺癌細(xì)胞系 A549、人肺腺癌耐藥細(xì)胞系 A549/DDP中的表達(dá)；利用pGenesil-miRNA-181a真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染A549/DDP細(xì)胞，同時設(shè)置未轉(zhuǎn)染組和空載組；實時熒光定量 PCR檢測 miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后

2、的表達(dá)情況；MTT方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細(xì)胞活力和順鉑（DDP）作用下增殖抑制率的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細(xì)胞周期和順鉑作用下細(xì)胞凋亡率的影響；Tran swell方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細(xì)胞侵襲能力的影響；Western-blot方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細(xì)胞中靶基因Bcl-2和p53蛋白表達(dá)的影響。

3、r>　　結(jié)果：miRNA-181a在A549和A549/DDP中的表達(dá)量顯著低于HELF，（p?0.05），且在A549/DDP中表達(dá)量最低；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP細(xì)胞后表達(dá)顯著升高，（p?0.05）；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP后能夠抑制其細(xì)胞生長活力、細(xì)胞周期和細(xì)胞侵襲能力（p?0.05）；同時促進(jìn)順鉑作用下A549/DDP細(xì)胞增殖抑制和細(xì)胞凋亡（p?0.05）；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP