莫西沙星在腹腔感染大鼠中的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)及種屬間的外推研究.pdf

1、目的：1.建立大腸埃希菌（Escherichia coli，E.coli6857）引起的大鼠腹腔感染模型，研究莫西沙星（Moxifloxacin）在腹腔感染大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)。2.建立莫西沙星在腹腔感染大鼠中的生理藥動(dòng)學(xué)（physiologically based pharmacokinetic，PBPK）模型，并進(jìn)行種屬間的外推至人，預(yù)測(cè)莫西沙星在不同種屬、不同年齡人群中的藥動(dòng)學(xué)行為和組織分布情況，促進(jìn)臨床合理用藥。
　　

2、方法：1.大鼠血漿中莫西沙星藥物濃度測(cè)定方法：高效液相色譜法（high–performance liquid chromatography,HPLC）；色譜柱：Kromasil C18（150 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：1％三乙胺（磷酸調(diào)pH至2.8）–甲醇（38:62，V：V）；紫外檢測(cè)波長：296 nm；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量：20μL；靈敏度：0.005AUFS；柱溫：室溫；內(nèi)標(biāo)物：環(huán)丙沙星。
　

3、　2.莫西沙星在腹腔感染大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)研究：通過左下腹腔注射臨床分離的E.coli6857菌液（濃度為2×109CFU/mL），建立大鼠腹腔感染模型。24只SD大鼠隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。在感染后2 h，治療組給予單劑量莫西沙星注射液40 mg/kg，對(duì)照組給予等量生理鹽水。于給藥前0 h和給藥后的4 h、8 h、24 h內(nèi)眥取血，測(cè)定血中細(xì)菌計(jì)數(shù)值。治療組大鼠分別在給藥后的5 min、10 min、20 min、30 min

4、、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h取血，用HPLC法測(cè)定大鼠血漿中莫西沙星的藥物濃度。計(jì)算莫西沙星抗E.coli6857的PK/PD參數(shù)值，并繪制莫西沙星24 h殺菌曲線。
　　3.大鼠生理藥動(dòng)學(xué)模型的建立和種屬間的外推研究：根據(jù)莫西沙星的理化性質(zhì)參數(shù)、體外數(shù)據(jù)及給藥信息等建立莫西沙星在大鼠中的生理藥動(dòng)學(xué)模型，利用實(shí)驗(yàn)測(cè)得的藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證。將成功建立和驗(yàn)證的大鼠 PBPK模型通過種屬間的外推至人，建立莫西沙星在人

5、體中的PBPK模型，并用文獻(xiàn)中實(shí)測(cè)血藥濃度數(shù)據(jù)對(duì)模型進(jìn)行再次驗(yàn)證；再將模型外推至老年男性和女性人群，預(yù)測(cè)莫西沙星在不同年齡人群中的藥動(dòng)學(xué)行為和組織分布特點(diǎn)。
　　結(jié)果：1.大鼠血漿中莫西沙星藥物濃度測(cè)定方法：在本研究的色譜條件下，莫西沙星保留時(shí)間約為21 min，內(nèi)標(biāo)物環(huán)丙沙星保留時(shí)間約為7.8 min，最低檢測(cè)濃度為0.2μg·mL-1，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：y=0.29x+0.0497（R2=0.9995），線性關(guān)系良好。線性范圍為

6、0.2~20.0μg·mL-1。低、中、高三個(gè)濃度的平均絕對(duì)回收率為76.27%，平均方法回收率為99.37%，日內(nèi)和日間精密度試驗(yàn)的RSD均在10%以內(nèi)，重復(fù)性試驗(yàn)RSD為1.22%，穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD均小于5.6%。
　　2.莫西沙星在腹腔感染大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)研究：莫西沙星在腹腔感染大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax、t1/2、AUC0-24、CL和V分別為11.151μg·mL-1、2.936h、28.913 h·μg·mL

7、-1、0.287 L·h-1和1.709 L。最終得到Cmax/MIC和AUC/MIC參數(shù)值分別為185.85和481.88 h。莫西沙星在腹腔感染大鼠體內(nèi)抗E.coli的24 h殺菌曲線顯示，大鼠接受藥物治療4~8 h后，血中細(xì)菌計(jì)數(shù)顯著下降約有3個(gè)Log值左右，治療24 h后，血中細(xì)菌幾乎被全部清除。
　　3.大鼠 PBPK模型的建立和種屬間的外推研究：研究建立了莫西沙星在腹腔感染大鼠體內(nèi)的PBPK模型，通過驗(yàn)證，結(jié)果顯示模型

8、預(yù)測(cè)的血藥濃度時(shí)間曲線與實(shí)驗(yàn)實(shí)測(cè)值擬合良好，倍數(shù)誤差均在2倍范圍以內(nèi)，模型可靠。通過種屬間外推至人體的模型后，驗(yàn)證結(jié)果顯示擬合良好，模型可靠。最終模型預(yù)測(cè)莫西沙星在不同年齡人群中藥動(dòng)學(xué)行為結(jié)果顯示，莫西沙星在不同年齡人群中的血藥濃度并沒有顯著差別。莫西沙星在人體組織中分布廣泛，在大多數(shù)組織中的濃度均高于血漿藥物濃度。在紅骨髓、腎、肝、脾、心、皮膚、肌肉和肺中的組織/血漿濃度比值分別為2.72、2.20、2.11、1.85、1.74、1.

9、62、1.60和1.34。
　　結(jié)論：本研究建立的HPLC測(cè)定大鼠血漿中莫西沙星的藥物濃度方法具有較高專屬性和靈敏度，重現(xiàn)性好，可以滿足血藥濃度測(cè)定和藥動(dòng)學(xué)研究的要求。成功建立了臨床分離E.coli6857的腹腔感染模型，莫西沙星對(duì)抗E.coli所致的腹腔感染顯示出良好的抗菌效果。PBPK模型可以可靠預(yù)測(cè)藥物在不同種屬間的藥動(dòng)學(xué)行為和組織分布情況。不同年齡人群中，莫西沙星的藥動(dòng)學(xué)行為并沒有顯著差別，無需調(diào)整給藥劑量。莫西沙星的組織