靶器官電刺激促進大鼠周圍神經再生和功能恢復.pdf

1、目的：
　　周圍神經損傷的發(fā)病率呈逐年增加的趨勢，神經損傷后的修復過程極其復雜，靶器官在修復過程中占有不可忽視的作用。為了探討靶器官在外周神經損傷后作用，以及電刺激靶器官促進神經再生及其機制，檢測再生神經數量和髓鞘成熟度，神經肌肉的運動和感覺功能的恢復，從神經肌肉形態(tài)學、功能學、行為學評價其修復周圍神經損傷的效果。
　　方法：
　　1、采用坐骨神經損傷模型上，給予電刺激治療（1h/d、100ms、500μA、2w）。觀

2、察術后8w通過腓腸肌濕重比、肌力檢測、HE染色、乙酰膽堿受體染色，肌肉中成肌因子家族蛋白的表達；
　　2、在體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌細胞系（L6），對骨骼肌細胞進行電刺激，檢測肌細胞增殖和凋亡能力，并觀察其成肌因子家族（MRFs）的變化；
　　3、坐骨神經損傷模型中，檢測再生遠端神經的免疫熒光染色、甲苯胺藍染色、電鏡、神經電生理、足跡步態(tài)分析，從形態(tài)學到行為學，觀察再生神經修復和靶器官功能恢復的效果；
　　4、股神經損傷模型

3、，同樣給予相同的電刺激治療方案，術后8w，通過足跡步態(tài)和逆向追蹤法，檢測再生神經修復和運動神經元選擇性再生，以及靶器官功能恢復的效果；
　　5、觀察靶器官電刺激對再生神經遠端神經營養(yǎng)因子（NTF）的mRNA水平表達的影響并研究其作用機制。
　　結果：
　　1、大鼠坐骨神經損傷模型中，電刺激組腓腸肌濕重比和肌力檢測均大于對照組；HE染色結果顯示：電刺激組平均肌纖維面積大于對照組；電刺激組單位面積內乙酰膽堿受體數量更多（P

4、<0.05;vs. Ctrl）。電刺激組成肌因子家族在肌肉中的蛋白水平和肌細胞中的mRNA水平表達均上調（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激有效的減緩了失神經的肌肉萎縮。
　　2、遠端再生神經免疫熒光和甲苯胺藍染色顯示ES組再生神經纖維數量多于對照組；且電子顯微鏡結果表明，ES組的再生神經髓鞘成熟度更好（再生神經數量，軸突直徑，髓鞘厚度和G值比）（P<0.05;vs. Ctrl）。電刺激促進外周神經損傷后修復再生。
　

5、　3、股神經模型中，電刺激治療明顯增加了再生神經元的數量和運動神經元的正確投射比例（P<0.05;vs. Ctrl），坐骨神經損傷模型術后8周，復合肌肉動作電位（CMAP），神經干電位（NAP）和坐骨神經功能指數（SFI）檢測的所有數據證明電刺激治療效果顯著。再生神經內神經細胞黏附因子（NCAM）和神經營養(yǎng)因子（NTF）在蛋白和mRNA水平表達都明顯上升（P<0.05;vs. Ctrl）。
　　結論：
　　靶器官電刺激治療外