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文檔簡介
1、目的:
自體神經(jīng)移植替代物——人工神經(jīng)導管因其制作規(guī)格的多樣性和批量生產(chǎn)的可行性等優(yōu)勢,在周圍神經(jīng)外科領域得到了廣泛應用。如何從制作材料和制作方法上改進人工神經(jīng)導管的設計,以最大程度模擬自體神經(jīng)的結構和組分,即是本論文的著眼點所在。
材料和方法:
1.采用靜電紡絲工藝制作膠原/PCL纖維支架材料(薄膜和導管),通過纖維形態(tài)觀察、親水性測試、力學測試、體外降解測試等對其進行表征;
2.采用復合膠原酶
2、消化差別分離法體外培養(yǎng)純化大鼠雪旺細胞,將純化后的雪旺細胞接種在膠原/PCL紡絲材料表面,觀察細胞與材料復合后黏附及增殖情況;
3.建立大鼠坐骨神經(jīng)缺損實驗動物模型,評價紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導管修復大鼠gmm坐骨神經(jīng)缺損的療效。綜合采用電生理學和組織形態(tài)分析學方法,從神經(jīng)到肌肉,從宏觀觀察到微觀形態(tài),從定性判斷到定量分析,評價軸突再生和肌肉神經(jīng)再支配的效果;
4.在上述復合材料基礎上加入經(jīng)羧基化修飾的多壁碳納米管
3、(CNTs),制作CNTs增強型紡絲膠原/PCL纖維支架材料(CNT-CoI/PCL),評價CNTs對材料力學及降解性能的影響,并對其進行初步的體內(nèi)生物相容性探索。
結果:
1.紡絲膠原/PCL復合材料薄膜和導管由亞微米級纖維構成,與細胞外基質(zhì)結構相似,具有良好的親水性和彈性,降解性能符合神經(jīng)導管要求;
2.雪旺細胞在膠原/PCL紡絲材料表面伸展良好,突起沿纖維走向伸長,材料對細胞的增殖無顯著性影響;
4、> 3.紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導管取得了與自體神經(jīng)相似的神經(jīng)缺損修復效果,且該紡絲導管的降解速率恰好與神經(jīng)再生速率相匹配;
4.經(jīng)羧基化修飾的多壁CNTs可均勻分散于膠原/PCL溶液中,并可紡絲形成纖維,材料的親水性較膠原/PCL材料更好,可承受的拉伸力更大,但降解要慢。在促進神經(jīng)纖維再生通過缺損和防止肌肉失神經(jīng)萎縮方面,CNT-Col/PCL復合材料基本起到了與自體神經(jīng)移植相似的效果,且在動物體內(nèi)沒有引起機體的排斥反應或
5、嚴重的慢性炎性反應。
結論:
1.靜電紡絲工藝可用于制作亞微米級/納米級纖維構成的膠原/PCL支架材料和CNTs增強型膠原/PCL支架材料。
2.紡絲支架材料支持雪旺細胞的黏附生長及增殖。
3.紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導管在促進大鼠坐骨神經(jīng)再生方面表現(xiàn)出色,在促進更多軸突長入遠側神經(jīng)斷端的同時可實現(xiàn)有效降解。
4.紡絲CNT-Col/PCL導管材料可有效促進再生神經(jīng)通過大鼠坐骨神經(jīng)8mm
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