新型周圍神經(jīng)支架材料的制備及其在周圍神經(jīng)損傷修復(fù)中的應(yīng)用.pdf

1、周圍神經(jīng)缺損后的再生和功能恢復(fù)一直是臨床中常見的難題，也是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域研究的熱門問題。目前最常用最有效的方法仍是自體神經(jīng)移植術(shù)。但自體神經(jīng)移植有其不足之處，因此，諸多學(xué)者推出了一些其他的修復(fù)法。如受損神經(jīng)自身延長端端縫合、神經(jīng)端側(cè)縫合、神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合、神經(jīng)斷端肌肉內(nèi)埋入、骨骼肌橋架移植、自體非神經(jīng)組織移植、同種異體神經(jīng)移植等，上述方法由于各自的局限性發(fā)展?jié)摿Σ淮螅瑔慰刻岣咄饪萍夹g(shù)，很難再提高周圍神經(jīng)外科的療效。 近年來，由于材料學(xué)

2、和醫(yī)學(xué)的結(jié)合日趨緊密，使得組織工程的進(jìn)展飛速。對于神經(jīng)修復(fù)的研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向?yàn)閷ι窠?jīng)再生的研究，著眼于使用人工神經(jīng)替代物來促進(jìn)周圍神經(jīng)再生，以達(dá)到神經(jīng)快速生長、功能完全恢復(fù)的理想目標(biāo)。周圍神經(jīng)不同于其它組織，外來的移植物并不行使缺損組織已經(jīng)失去或降低的功能，只是通過SCs細(xì)胞、神經(jīng)膜和神經(jīng)營養(yǎng)因子等起到暫時(shí)的支架作用，促進(jìn)神經(jīng)再生、支持和引導(dǎo)再生軸突到達(dá)遠(yuǎn)端靶器官。通常模擬神經(jīng)結(jié)構(gòu)來構(gòu)建人工神經(jīng)支架：天然或人工合成的導(dǎo)管模擬神經(jīng)外膜或神經(jīng)束

3、膜，導(dǎo)管內(nèi)充填條索狀、細(xì)管狀(模擬神經(jīng)內(nèi)膜管)或海綿狀物質(zhì)，作為引導(dǎo)雪旺氏細(xì)胞遷移和神經(jīng)軸突生長的通道。 研究表明，用細(xì)胞外基質(zhì)制成的海綿狀結(jié)構(gòu)的周圍神經(jīng)支架材料不僅具有良好的生物相容性及可降解性，同時(shí)也有利于神經(jīng)纖維的遷延和生長。由于Ⅰ型膠原吸收快，故本實(shí)驗(yàn)中選用殼聚糖為神經(jīng)支架外殼。殼聚糖是天然高分子聚合物的優(yōu)勢在于無免疫原性，無毒性，無刺激性，無熱原反應(yīng)，無致突變乃致死性突變效應(yīng)，并具有來源廣泛、價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用

4、于生物領(lǐng)域，而且在神經(jīng)誘導(dǎo)修復(fù)手術(shù)后，可以不必再行二次手術(shù)將其取出，是理想的細(xì)胞支架材料。 本論文構(gòu)建了一種新型周圍神經(jīng)支架并用以修復(fù)兔周圍神經(jīng)缺損，建立了一種構(gòu)建周圍神經(jīng)的方法，希望能為周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)提供一種可行的選擇。實(shí)驗(yàn)分為以下兩個(gè)部分： 1、周圍神經(jīng)支架的構(gòu)建.目的：以殼聚糖復(fù)合Ⅰ型膠原蛋白利用自制的周圍神經(jīng)模具通過冷凍干燥技術(shù)制備一種周圍神經(jīng)支架材料。方法：從SD大鼠鼠尾中提取高純度的Ⅰ型膠原蛋白，將其與殼

5、聚糖分別溶于0.2M醋酸溶液中，利用自制的周圍神經(jīng)模具制備成管狀支架，冷凍干燥，以紫外線照射的方法使其交聯(lián)。經(jīng)掃描電鏡觀察、比較其與周圍神經(jīng)的異同、測量微孔直徑、計(jì)算孔隙率。測試0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)中30d體外降解率。并埋入SD大鼠皮下看其與周圍組織反應(yīng)。結(jié)果：制備出的支架材料具有半透性外殼及高孔隙率的內(nèi)部海綿狀結(jié)構(gòu)，其微孔直徑為15-55μm，孔隙率為95％，體外降解率為19％，與周圍組織無毒性反應(yīng)。結(jié)論：以殼聚糖

6、復(fù)合Ⅰ型膠原蛋白結(jié)合冷凍干燥技術(shù)，制備出具有半透性外殼及高孔隙率內(nèi)部海綿狀結(jié)構(gòu)的神經(jīng)支架材料，生物相容性良好具應(yīng)用潛力。 2、周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)：目的：以形態(tài)學(xué)方法觀測殼聚糖復(fù)合膠原蛋白支架材料橋接兔坐骨神經(jīng)15mm缺損的療效。方法：以殼聚糖復(fù)合膠原蛋白經(jīng)冷凍干燥技術(shù)制備新型周圍神經(jīng)支架材料，并用此材料橋接修復(fù)兔坐骨神經(jīng)缺損15mm,術(shù)后24W分別以辣根過氧化物酶(HRP)逆行示蹤，HE、甲苯胺藍(lán)染色法，掃描電鏡及電生理等方法觀