神經(jīng)寄養(yǎng)修復(fù)周圍神經(jīng)損傷的療效和分子機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述：
　　第一部分 端側(cè)吻合修復(fù)大鼠周圍神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:探討不同方式的端側(cè)吻合修復(fù)周圍神經(jīng)損傷對(duì)供體、受體神經(jīng)再生和肌肉萎縮保護(hù)的影響。
　　方法:60只Lewis大鼠腓神經(jīng)切斷后，按照不同顯微外科修復(fù)方式隨機(jī)分為3組:A組（20只），腓神經(jīng)遠(yuǎn)近斷端行原位神經(jīng)外膜縫合;B組（20只），脛神經(jīng)外膜開窗，與腓神經(jīng)遠(yuǎn)斷端行端側(cè)神經(jīng)外膜吻合;C組（20只），脛神經(jīng)40％切斷，與腓神經(jīng)遠(yuǎn)

2、斷端行端側(cè)神經(jīng)外膜吻合。術(shù)后6周、12周、18周和24周，每組各取5只大鼠，神經(jīng)電生理檢測(cè)脛神經(jīng)、腓神經(jīng)的潛伏期和振幅恢復(fù)率，檢測(cè)腓腸肌和脛前肌最大強(qiáng)直肌張力恢復(fù)率，大鼠處死后測(cè)量腓腸肌和脛前肌肌重維持率，肌肉石蠟切片HE染色測(cè)量最大肌纖維橫截面積恢復(fù)率，脛神經(jīng)和腓神經(jīng)半薄切片后行甲苯胺藍(lán)染色觀察神經(jīng)纖維再生，檢測(cè)有髓神經(jīng)纖維恢復(fù)率。
　　結(jié)果:1.供體神經(jīng)肌肉系統(tǒng):
　　各時(shí)間點(diǎn)，B組大鼠脛神經(jīng)電生理、有髓纖維組織形態(tài)學(xué)以

3、及腓腸肌肌濕重、肌纖維橫截面積和肌力與A組無顯著差異;C組大鼠脛神經(jīng)神經(jīng)電生理(ARR和LDR)術(shù)后6周均明顯受累，ARR均較其余兩組明顯減低，LDR較A組和B組明顯延長(zhǎng)，12周后各組ARR和LDR無差異;C組大鼠脛神經(jīng)有髓纖維恢復(fù)率在術(shù)后6周和12周明顯低于B組，術(shù)后18周和24周時(shí)與B組無明顯差異;C組大鼠腓腸肌肌重、肌力和肌纖維面積在研究早期（6周-18周）不同程度受損，術(shù)后24周均獲得有效恢復(fù)。
　　2.受體神經(jīng)肌肉系統(tǒng):

4、
　　術(shù)后18和24周，B組大鼠腓神經(jīng)潛伏期較A組和C組明顯延長(zhǎng)。各時(shí)間點(diǎn)C組大鼠腓神經(jīng)有髓纖維數(shù)目、脛前肌最大強(qiáng)直肌力恢復(fù)率和肌纖維橫截面積恢復(fù)率均較B組明顯增高，與A組無明顯差別。術(shù)后6周，各組脛前肌肌重維持率無顯著差異，12周后A組和C組脛前肌肌重維持率均顯著高于B組。
　　結(jié)論:伴有供體神經(jīng)外膜開窗或部分切斷的端側(cè)吻合均可獲得受體神經(jīng)纖維再生和受體肌肉肌重、肌力的恢復(fù)。外膜開窗對(duì)供體神經(jīng)肌肉系統(tǒng)不會(huì)產(chǎn)生顯著的影響和損

5、害。部分供體神經(jīng)切斷的端側(cè)吻合可以獲得更有效的神經(jīng)肌肉系統(tǒng)恢復(fù)，但術(shù)后早期難以避免發(fā)生供體系統(tǒng)的損害。
　　第二部分 “Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)修復(fù)周圍神經(jīng)損傷的療效和機(jī)制研究
　　目的:研究應(yīng)用“Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)法修復(fù)大鼠周圍神經(jīng)損傷的可行性和療效，并初步探討其分子機(jī)制。
　　方法:80只Lewis大鼠腓神經(jīng)切斷后，按照不同顯微外科修復(fù)方式隨機(jī)分為4組:A組（20只），腓神經(jīng)遠(yuǎn)、近斷端曠置，縫合于

6、鄰近的肌肉內(nèi);B組（20只），腓神經(jīng)遠(yuǎn)近斷端行原位神經(jīng)外膜縫合;C組（20只），脛神經(jīng)外膜開窗，與腓神經(jīng)遠(yuǎn)端行端側(cè)吻合;D組（20只）脛神經(jīng)40％切斷，與腓神經(jīng)遠(yuǎn)斷端行端側(cè)吻合。術(shù)后8周，各組大鼠行二次手術(shù)，將腓神經(jīng)遠(yuǎn)端與近端行端端外膜縫合。二次術(shù)后4周、8周、12周和24周，每組各取5只大鼠神經(jīng)電生理檢測(cè)腓神經(jīng)的LDRs和ARRs，半薄切片甲苯胺藍(lán)染色觀察神經(jīng)纖維再生，檢測(cè)有髓神經(jīng)纖維恢復(fù)率;檢測(cè)脛前肌強(qiáng)直肌張力恢復(fù)率、肌重維持率和最

7、大肌纖維面積恢復(fù)率。各時(shí)間點(diǎn)大鼠處死后取L4-6脊髓節(jié)段和脛前肌行石蠟切片，免疫組化染色觀察脊髓和肌肉中IGF-1的表達(dá)，以及肌肉中TWEAK和Fn14因子的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:術(shù)后4周和8周，B組大鼠腓神經(jīng)ARR較其余三組均明顯增高;術(shù)后24周，各組ARR無明顯不同。術(shù)后4周，B組、C組和D組大鼠腓神經(jīng)LDR無顯著差異，B組較A組明顯減低;術(shù)后24周，B組與D組LDR無明顯差異，較A組與C組明顯降低。術(shù)后4周，B組有髓纖維數(shù)日

8、明顯高于其余三組，D組纖維數(shù)目明顯高于A組和C組;術(shù)后24周，B組與D組有髓纖維數(shù)目無顯著差別，均高于A組和C組。
　　術(shù)后4周-12周，B組大鼠脛前肌肌力恢復(fù)率TTRR明顯高于其余三組，術(shù)后24周與D組無明顯差異，高于A組。術(shù)后4周，D組大鼠脛前肌TTRR與A組和C組無差異;術(shù)后24周與C組無差異，較A組仍明顯增高。
　　術(shù)后4周-12周，B組大鼠脛前肌肌重維持率MWMR明顯高于其余三組，術(shù)后24周與D組無差異。術(shù)后4周，

9、D組大鼠脛前肌MWMR與A組和C組無差異，術(shù)后8周較A組和C組顯著增高，術(shù)后12周和24周與C組無差異，但仍較A組明顯增高。
　　術(shù)后4周，B組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復(fù)率明顯高于其余三組，A組、C組和D組間無差異;術(shù)后24周，B組和D組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復(fù)率明顯高于A組和C組，B組仍較D組明顯增高。
　　免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:脊髓中IGF-1表達(dá)B組與D組相似，近期（4周）和遠(yuǎn)期（24周）蛋白表達(dá)均較A組C組增高;術(shù)

10、后4周，C組和D組脛前肌IGF-1大量表達(dá)，較A組和B組明顯增高，24周時(shí)各組IGF-1表達(dá)無差異。4周時(shí)A組、C組和D組脛前肌中TWEAK和Fn14表達(dá)均較B組顯著增高;術(shù)后24周，各組TWEAK表達(dá)無差異，D組Fn14表達(dá)與B組和C組無差異，顯著低于A組。
　　結(jié)論:“Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)法可用于治療長(zhǎng)節(jié)段復(fù)雜周圍神經(jīng)損傷，早期療效不及端端吻合，遠(yuǎn)期可有效恢復(fù)神經(jīng)及其支配肌肉的結(jié)構(gòu)和功能。40％供體神經(jīng)寄養(yǎng)較外膜開窗