采用纖維素手性色譜柱LC-MS-MS法測定犬血漿中泮托拉唑對映異構體.pdf

1、背景泮托拉唑（pantoprazole, PAN）是選擇性長效質子泵抑制劑，主要用于治療胃、十二指腸潰瘍和反流性食管炎等胃腸道高分泌疾病。結構中含有一手性中心硫原子，為光學對映異構體。藥效學研究表明,左旋泮托拉唑具有明顯的抗?jié)冏饔茫饔脧娪阢欣蛳w和其右旋體。左旋泮托拉唑由印度Emcure公司首先研發(fā)，于2006年上市，但國內未上市，臨床上以外消旋體給藥。有文獻報道用Chiral-AGP柱、Ultron ES-OVM柱、 Chi

2、ralcel OD-RH柱、Lux cellulose-2柱、Lux amylose-2柱等手性色譜柱對泮托拉唑進行手性分析。
　　目的文章旨在通過改進手性色譜系統(tǒng)，建立更快速、靈敏的液相色譜-串聯(lián)質譜（ LC-MS/MS）法，測定犬血漿中泮托拉唑對映異構體，并應用于比格犬的藥動學試驗，為開發(fā)單一光學異構體S-泮托拉唑提供相應的藥動學數(shù)據(jù)。
　　方法為了提高泮托拉唑對映異構體的分離度，嘗試采用新型的手性色譜柱。以d5-泮托拉

3、唑為內標，血漿樣品經乙腈沉淀蛋白后，通過纖維素手性色譜柱 Lux cellulose-4柱進行分離。流動相為10 mmol/L醋酸銨水溶液:乙腈（20:80，v/v），流速為0.4 mL·min-1，等度洗脫，進樣體積為2.0μL，樣品分析時間為5.0 min。采用電噴霧電離源（ESI）正離子、多反應監(jiān)測模式（MRM）進行監(jiān)測，用于定量分析的離子反應分別為m/z384.4→200.1（泮托拉唑）和m/z389.4→205.2（內標d5-

4、泮托拉唑）。
　　結果泮托拉唑兩對映體在2.00~4000 ng·mL-1范圍內線性良好，定量下限均可達2.00 ng·mL-1，S-泮托拉唑和R-泮托拉唑兩對映體的色譜分離度為3.4，色譜分析時間為5 min，S-泮托拉唑日內、日間精密度（RSD）均小于5.3％，準確度（RE）在?0.3%~1.6%之間，R-泮托拉唑日內、日間精密度（RSD）均小于4.9%，準確度（RE）在0.1%~1.8%之間，均符合生物樣品分析相關要求。將驗

5、證后的方法應用于泮托拉唑對映異構體在比格犬體內的藥動學研究。比格犬靜脈輸注給予不同劑量（1,2,4 mg/kg）S-泮托拉唑鈉后，S-泮托拉唑的血漿濃度達峰時間Tmax為0.53 h，血漿消除半衰期t1/2為0.42 h，Cmax和AUC隨劑量增大而增加，并具有線性趨勢。S-泮托拉唑對映體（2 mg/kg）單獨給藥和其作為外消旋體組分給藥時，AUC分別為3785±1076 ng·mL-1·h和3848±1381 ng·mL-1·h，R-

6、泮托拉唑對映體（2 mg/kg）單獨給藥和其作為外消旋體組分給藥時， AUC分別為3622±1405 ng·mL-1·h和3692±1478 ng·mL-1·h。各對映體單獨給藥與其作為外消旋體組分給藥后相比，藥動學性質基本一致。各對映體單獨給藥后，血漿測不到其異構體，表明各對映體在體內不發(fā)生構型轉化。
　　結論文章采用Lux cellulose-4手性色譜柱，明顯改善了泮托拉唑對映異構體的分離度，且峰形好，分析時間短。建立了更靈