姜黃素對(duì)DSS誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜屏障的保護(hù)及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)是一種好發(fā)于結(jié)直腸的慢性非特性炎癥性腸病，以腹瀉、腹痛、血便伴里急后重為主要臨床癥狀，病變部位主要累及結(jié)、直腸的黏膜及黏膜下層且病情遷延不愈。UC在歐美等發(fā)達(dá)國家較為常見，但是隨著我國經(jīng)濟(jì)的不斷增長及生活物質(zhì)水平不斷提高，在消化系統(tǒng)疾病就診的人群中該病的診出率不斷升高且日趨常見。
　　目前關(guān)于UC的具體發(fā)病機(jī)制尚無定論，但眾多的臨床數(shù)據(jù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明該病的

2、發(fā)生伴有明顯的腸道免疫失衡。為了更深入的研究該疾病及模擬其臨床的類似病理改變，246-三硝基苯磺酸(Ttrinitro-benzene-sulfonic acid，TNBS)和葡聚糖硫酸鈉((Dextransulfate sodium，DSS)誘導(dǎo)的腸炎模型最為常見，其中DSS有著更簡單的操作手段和更接近臨床的病理表現(xiàn)，因此其成為近二十年來最為常用的腸炎模型誘導(dǎo)劑。
　　姜黃素是從姜科或天南星科植物的根莖中提取的一種化學(xué)成分，其中

3、含姜黃約3％～6％，是植物界中少有含二酮的色素，為二酮類化合物。越來越多的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)姜黃素對(duì)UC有著明顯的控制作用。
　　腸上皮間淋巴細(xì)胞(Intestinal intraepithelial lymphocytes，IEL)為腸道的免疫屏障主要構(gòu)成體，在維持腸道穩(wěn)態(tài)中扮演者至關(guān)重要的作用。它可以分泌KGF、TGF-β和IL-10促進(jìn)腸上皮的更新與修復(fù)，還可以通過直接抵或分泌細(xì)菌肽抗入侵腸道的病原菌。另外也有研究報(bào)道UC患者腸標(biāo)

4、本中伴有明顯的IEL細(xì)胞亞群變化。
　　姜黃素可以明顯緩解UC，而不管是UC患者還是實(shí)驗(yàn)中由DSS誘導(dǎo)的炎癥性腸病模型腸道的IEL亞群都發(fā)生了明顯的變化。本研究通過構(gòu)建小鼠的潰瘍性結(jié)腸炎模型，研究姜黃素對(duì)腸黏膜屏障的保護(hù)其具體機(jī)制可能通過調(diào)節(jié)腸道IEL亞群實(shí)現(xiàn)。
　　方法:
　　1.構(gòu)建小鼠DSS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型，通過DAI評(píng)分、HE染色、RT-PCR、Ussing Chamber等手段，觀察結(jié)腸黏膜炎癥損傷情況

5、。
　　2.圍繞結(jié)腸炎模型，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR技術(shù)，觀察IEL亞群的變化情況及其相應(yīng)分泌的細(xì)胞因子變化。
　　3.DSS誘導(dǎo)小鼠的同時(shí)給予姜黃素治療，采用DAI評(píng)分、PT-PCR、HE染色、UssingChamber等技術(shù)，檢測腸黏膜的炎癥變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)腸IEL亞群的變化情況。
　　結(jié)果:
　　1.與對(duì)照組比較，DSS處理組結(jié)腸黏膜明顯斷裂、脫落、分離且通透性升高，DAI評(píng)分顯著升高;與DSS組

6、相比，經(jīng)過對(duì)DSS+姜黃素治療組(濃度為80mg/mL)處理五天結(jié)腸黏膜的炎癥損傷情況明顯得到緩解，結(jié)腸組織黏膜的通透性和小鼠的DAI評(píng)分降低明顯。
　　2.與對(duì)照組比較，DSS組結(jié)腸黏膜產(chǎn)生更多的炎癥介質(zhì)及IEL分泌的保護(hù)性細(xì)胞因子明顯減少;與DSS組相比，DSS+姜黃素治療組腸黏膜組織中的破壞性炎癥介質(zhì)明顯降低、IEL產(chǎn)生的保護(hù)性細(xì)胞因子升高。
　　3.與對(duì)照組比較，DSS組IEL亞群比例CD8αα和γδ IEL顯著降低