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文檔簡介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在觀察姜黃素加大豆低聚糖對潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的治療作用。探討細(xì)胞因子(IL-1β、IL-4、IL-6)和核因子-ΚBp65(NF-ΚBp65)在UC發(fā)病中的可能作用機(jī)制。
方法:選取雄性SD大鼠80只,隨機(jī)分成4組,每組20只,分別為:正常組、柳氮磺胺吡啶(SASP)組、模型組、姜黃素加大豆低聚糖(Cur plus SBOS)組。除正常組外,其余3組動(dòng)物分別用2,4二硝基氯苯(DNCB)灌腸和滴背處理建立大鼠潰
2、瘍性結(jié)腸炎模型。處理后每天觀察,以大鼠一般情況差和出現(xiàn)膿血便作為造模成功的判斷標(biāo)準(zhǔn),造模成功后,收集大便一次,檢測大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌含量。并給予治療處理:SASP組給予SASP溶液100mg/kg(即每千克體重給藥100mg)灌胃,每日一次;姜黃素加大豆低聚糖組給予姜黃素100mg/kg,大豆低聚糖3.33ml/kg灌胃,每日一次;正常組和模型組僅給予1%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃,每日一次。所有動(dòng)物均給予灌胃治療4周,完
3、畢收集糞便一次,檢測大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌含量。第5周斷頭處死全部大鼠并收集血液4ml,離心收集血清樣本待測;同時(shí)解剖結(jié)腸組織,肉眼觀察結(jié)腸粘膜大體形態(tài)損傷并計(jì)算得分,剪取病變最明顯處結(jié)腸組織制作石蠟塊。采用雙抗體夾心ABC-ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附測定法)檢測血清白細(xì)胞介素-1β(IL-1β),白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-4(IL-4)的含量;結(jié)腸組織蠟塊行病理切片后部分進(jìn)行蘇木精-伊紅(HE)染色并拍照,
4、計(jì)算結(jié)腸粘膜組織學(xué)損傷得分;部分進(jìn)行免疫組化(IHC)檢測結(jié)腸粘膜NF-κ B p65的表達(dá)情況。
結(jié)果:治療前,UC模型組大鼠結(jié)腸粘膜大體形態(tài)和組織學(xué)損傷評分以及血清IL-1β,IL-6水平最高,血清IL-4水平和結(jié)腸粘膜NF-κ Bp65灰度值最低;大鼠糞便菌群中大腸桿菌、腸球菌含量最高,雙歧桿菌、乳酸桿菌含量最低。治療后,與模型組比較,姜黃素加大豆低聚糖組大鼠結(jié)腸粘膜大體形態(tài)和組織學(xué)損傷評分及血清IL-1β,IL-6水平
5、顯著降低(P<0.01);血清IL-4水平和結(jié)腸粘膜NF-κ Bp65灰度值顯著升高(P<0.01),與SASP組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);該組大鼠糞便菌群中大腸桿菌、腸球菌含量較模型組、SASP組及治療前均降低(P<0.05),而雙歧桿菌、乳酸桿菌明顯增多,有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
結(jié)論:姜黃素加大豆低聚糖能促進(jìn)潰瘍性結(jié)腸炎的愈合。其可能的作用機(jī)制是Cur的抗炎作用,它能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的釋放,通過抑制NF
6、-Κ B激活途徑中的關(guān)鍵酶、抑制部分NF-Κ B活化的信號(主要為細(xì)胞因子)以及上調(diào)結(jié)腸組織中PPAR-γ的表達(dá)而負(fù)性調(diào)節(jié)NF-Κ B表達(dá)等來阻斷NF-Κ B信號通路,從而阻斷炎癥的放大效應(yīng)而達(dá)到顯著的抗炎效果,減輕結(jié)腸粘膜炎癥反應(yīng)和組織的損傷,對潰瘍性結(jié)腸炎起保護(hù)作用。SBOS能促進(jìn)腸道有益菌的增殖特別是雙歧桿菌,減少致病菌的生長;同時(shí)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞因子維持腸道粘膜屏障、上皮的完整性以及增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性從而緩解結(jié)腸粘膜的炎癥反應(yīng),促使
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