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文檔簡介
1、目的:探討流式細胞術(FCM)與序列特異性引物聚合酶鏈式反應(PCR-SSP)檢測人類白細胞表面抗原-B27(HLA-B27)在強直性脊柱炎(AS)中的診斷價值;觀察HLA-B27等位基因亞型在本地區(qū)的分布情況;了解免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機制。
方法:通過病例回顧性分析,了解HLA-B27檢測人群的基本情況,探討FCM法檢測HLA-B27對AS的診斷價值;采用PCR-SSP法和FCM法檢測AS患者組、疑似AS患者組和健
2、康對照組的HLA-B27,并對HLA-B27等位基因亞型進行分型鑒定,使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對結果進行統(tǒng)計分析;通過受試者工作特征(ROC)曲線對兩種檢測方法進行方法學評價;對分組病例進行淋巴細胞亞群絕對計數(shù)和相關細胞因子的檢測,采用獨立樣本t檢驗和方差分析對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,探討免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機制。
結果:1.246例疑似AS就診患者的年齡主要集中在21~55歲之間,共確診AS患者42例,其中HLA-B
3、27陽性患者28例,占確診人數(shù)66.7%。FCM法檢測HLA-B27ROC曲線下面積(AUC)為0.758(95%CI為0.659~0.856),由圖得到的最佳cut-off值為147.5,在此臨界點,敏感度為66.7%,特異度為89.7%,約登指數(shù)為0.564。
2.三組資料中PCR-SSP法共檢出HLA-B27陽性患者45例,其中B*2701型1例;B*2702型5例;B*2704型28例;HLA-B*2705型11例。P
4、CR-SSP法和FCM法檢測HLA-B27的ROC曲線下面積分別為0.913、0.884;PCR-SSP法的靈敏度、特異度分別為94.1%、84.0%;FCM法的靈敏度、特異度分別為64.7%、88.0%。
3.AS組與健康對照組相比CD4+T淋巴細胞絕對計數(shù)值明顯升高;CD8+T淋巴細胞和B淋巴細胞絕對計數(shù)值均下降,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);AS組較疑似AS組相比,CD3+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞絕對值低于疑
5、似組,差異有統(tǒng)計學意義,其他指標差異無統(tǒng)計學意義;疑似AS組與健康組進行比對得到疑似組CD3+T淋巴細胞和CD4+T淋巴細胞絕對值明顯低于健康對照組的結果,差異具有統(tǒng)計學意義,其他指標差異無統(tǒng)計學意義。
4.AS組TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17表達水平較健康對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);IL-4水平較健康對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義;IL-2、TGF-β1水平較健康對照組有上升趨勢,但無
6、統(tǒng)計學意義。AS組各細胞因子水平較疑似組相比TNF-α、IFN-γ、IL-17明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其他因子差異均無統(tǒng)計學意義。疑似組較健康對照組除TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17升高,IL-4水平降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其他因子表達水平無明顯差異。
結論:1.內蒙古地區(qū)強直性脊柱炎患病情況和全國情況基本一致,發(fā)病人群主要集中在青壯年男性;FCM法在檢測HLA-B27時具有
7、良好的穩(wěn)定性,但灰區(qū)樣本比例高,給臨床檢驗工作帶來一定困擾。
2.PCR-SSP法檢測HLA-B27對AS的診斷效能明顯優(yōu)于FCM法,PCR-SSP法檢測HLA-B27是未來發(fā)展的趨勢;內蒙古地區(qū)HLA-B27等位基因主要以B*2704和B*2705為主。
3.AS的發(fā)病與免疫系統(tǒng)作用密切相關,尤其是CD4+T淋巴細胞在AS疾病發(fā)展過程中起主導作用,可進一步深入研究。
4.TNF-α、IFN-γ、IL-4、
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