NMDA受體拮抗劑對高銅灌注抑郁大鼠的影響機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過建立高銅（Copper。Cu）灌注抑郁大鼠模型，采用 N-甲基-D-天冬氨酸（N-mehty-D-asparticacid。NMDA）受體拮抗劑對大鼠進(jìn)行干預(yù)，探討 Cu與 NMDA受體的相互作用機(jī)制，為尋找抑郁癥有效的藥物治療提供新的思路。
　　方法:
　　44只雄性 SD成年大鼠隨機(jī)分為4組，A組為皮質(zhì)酮(Hydrocortisone,CORT)組，每天隨機(jī)選擇時(shí)間予 CORT20mg/kg,皮下注射給藥(su

2、bcutaneous injection,s.c)，同時(shí)接受生理鹽水1ml/kg，灌胃給藥(intragastric administration,i.g)。B組為 CORT+高銅(copper,Cu)組，于每天同樣時(shí)間段接受CORT20mg/kg,s.c+銅溶液(Cu)7mg/kg。i.g；C組為單純灌 Cu組，接受 Cu7mg/kg。i.g；D組為正常對照(health control,HC)組，接受生理鹽水1ml/kg。i.g。模

3、型建立持續(xù)21天。定期監(jiān)測四組大鼠的體重、活動(dòng)情況、進(jìn)食量等，刺激結(jié)束后進(jìn)行攝食測試、糖水偏好測試、曠場試驗(yàn)及 Morris水迷宮等行為學(xué)測試。行為學(xué)測試結(jié)束后，將每組大鼠中的其中5只處死，取血樣本和腦組織保存待測，剩余大鼠接受 NMDA受體拮抗劑美金剛進(jìn)行干預(yù)。藥物濃度為20mg/kg。i.g，且14天干預(yù)結(jié)束后同樣進(jìn)行行為學(xué)測試，測試結(jié)束后將剩余所有大鼠處死，取血樣本和腦組織保存。檢測干預(yù)前后血樣本的血清銅離子含量和腦組織 NMDA

4、R1表達(dá)以及谷氨酸受體離子化 NMDA1受體基因(Glutamate Receptor,Ionotropic NMDA1 gene。Grin1)表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.經(jīng)皮質(zhì)酮處理的大鼠的體重隨時(shí)間推移呈逐步減輕的變化趨勢，尤以CORT+Cu組大鼠的體重下降明顯(F=68.97。p=0.000; F=142.26。p=0.000;F=76.22，p=0.000)。單純灌 Cu組大鼠的體重變化與 HC組無顯著差異。CO

5、RT、CORT+Cu及 Cu組大鼠的攝食量及糖水偏好度均較 HC組顯著下降(F=21.945，p=0.000。F=52.159。p=0.000)。在曠場實(shí)驗(yàn)中。CORT組和 CORT+Cu組大鼠的活動(dòng)距離和速度均顯著低于 HC組(F=4.23。p=0.000。F=5.73。p=0.002)。Morris水迷宮測試中，四組大鼠從第3天起逃避潛伏期出現(xiàn)顯著差異(F=3.453，p=0.025)，CORT+Cu組在第3天的逃避潛伏期高于其他三

6、組，第4、5天。CORT+Cu組的逃避潛伏期均高于 CORT組和 Cu組。CORT組和 Cu組的逃避潛伏期均高于 HC組(F=7.249,p=0.001;F=11.873,p=0.000)。CORT組、CORT+Cu組和 Cu組在探索測試的穿越平臺(tái)次數(shù)顯著少于 HC組(F=17.526。p=0.000)。
　　2.NMDA受體拮抗劑美金剛干預(yù)前后對比發(fā)現(xiàn)。CORT及 CORT+Cu組大鼠干預(yù)后的攝食量顯著增加（t=-2.509,p

7、=0.046;t=-4.75,p=0.005）。CORT組大鼠干預(yù)后的糖水偏好度有顯著增加（t=-6.959,p=0.000），CORT、CORT+Cu以及 Cu組等三組大鼠干預(yù)后在曠場試驗(yàn)中活動(dòng)總路程有顯著增加（t=-3.764,p=0.009。t=-4.872,p=0.005。t=-4.915,p=0.004）。CORT+Cu以及 Cu組大鼠干預(yù)后在曠場試驗(yàn)中平均速度有顯著增加（t=-4.23,p=0.008。t=-4.635,p=

8、0.006）。CORT+Cu組大鼠在 Morris水迷宮測試的逃避潛伏期較干預(yù)前明顯縮短，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯增加（t=2.843,p=0.036; t=2.786。p=0.039;t=5.073,p=0.004; t=3.465,p=0.018; t=3.807,p=0.013; t=-6.5,p=0.001)。
　　3.CORT及 CORT+Cu組大鼠的血清銅水平顯著高于 Cu組及對照組，未發(fā)現(xiàn) Cu組與 HC組的血清銅水平存在差

9、異(F=11.7,p=0.000)。經(jīng) NMDA受體拮抗劑干預(yù)后，各組大鼠的血清 Cu水平較干預(yù)前降低，差異有顯著性(t=9.625,p=0.025;t=3.207,p=0.000;t=0.003,p=0.003;t=1.943,p=0.003)。
　　4.CORT組、CORT+Cu組及 Cu組大鼠的NMDA1受體及 Grin1基因表達(dá)在皮質(zhì)酮注射及高銅灌注后與 HC組相比未存在差異(F=3.168,p=0.053;F=1.041

10、,p=0.401)。NMDA受體拮抗劑干預(yù)后，各組大鼠的NMDA1受體(t=0.681,p=0.077;t=0.817,p=0.329;t=0.012,p=0.561;t=0.765,p=0.873)及Grin1基因表達(dá)(t=0.565,p=0.619;t=2.388,p=0.121;t=4.339,p=0.211;t=0.476,p=0.112)較干預(yù)前亦無顯著變化。
　　結(jié)論:
　　1.銅離子可能加重皮質(zhì)酮所致的大鼠抑郁