燈盞花素包合物脂質(zhì)體的制備及其特性考察.pdf

1、目的:燈盞花素(breviscap ine)是菊科植物短葶飛蓬(Erigeron breviscapus)的全草，其中主要成分是燈盞花乙素(scu tellarin)，另含少量燈盞花甲素(apigenin)。燈盞花素具有增加心腦血流量、改善心腦微循環(huán)等作用。目前臨床主要用于治療腦梗塞、冠心病、心絞痛等心腦血管疾病。但是燈盞花素水溶性差，口服生物利用度低，靜脈注射消除半衰期短都限制了其臨床應(yīng)用。
　　環(huán)糊精包合物脂質(zhì)體(Drug i

2、n inclusion complex in liposome，DCL)是將環(huán)糊精包合物和脂質(zhì)體結(jié)合研究的產(chǎn)物。環(huán)糊精具有筒狀結(jié)構(gòu)，外側(cè)是親水性基團(tuán)，內(nèi)側(cè)為疏水性基團(tuán)，疏水性藥物可以通過(guò)氫鍵、范德華力等作用力與環(huán)糊精內(nèi)側(cè)的疏水性基團(tuán)結(jié)合，形成環(huán)糊精包合物，從而增加疏水性藥物的溶解度，但是這種結(jié)合力并不穩(wěn)定，使得形成的包合物易分解。脂質(zhì)體是由磷脂和膽固醇組成的類似細(xì)胞膜的脂質(zhì)囊泡，外層是疏水性脂質(zhì)基團(tuán)，中間是親水性內(nèi)核，親水性藥物被包封在

3、內(nèi)核中，而疏水性藥物被包封在脂質(zhì)層中。脂質(zhì)體可以保護(hù)藥物不被血漿快速清除代謝，從而延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，可以很好的解決包合物易分解的問(wèn)題。因此，本課題擬以燈盞花素的主要成分燈盞花乙素為指標(biāo)，考察其溶解度，制備燈盞花素包合物脂質(zhì)體，以延長(zhǎng)其在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間。
　　方法:
　　建立高效液相色譜(HPCL)法測(cè)定燈盞花素中燈盞花乙素的濃度，以燈盞花素中的燈盞花乙素為指標(biāo)，研究燈盞花素在不同溶劑中的平衡溶解度。以包合物對(duì)燈盞花素

4、的包封率為指標(biāo)，考察飽和水溶液法和超聲法制備燈盞花素包合物的工藝，單因素考察制備包合物過(guò)程中對(duì)包封率影響較大的因素，利用正交實(shí)驗(yàn)篩選處方。采用超速離心法測(cè)定包合物脂質(zhì)體中燈盞花素的包封率，并以此為指標(biāo)，單因素考察對(duì)包封率影響較大的因素，在此基礎(chǔ)上，引入總評(píng)歸一值，利用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法篩選制備燈盞花素包合物脂質(zhì)體的最優(yōu)處方。
　　以燈盞花素中燈盞花乙素的濃度為指標(biāo)，考察燈盞花素在不同溶出介質(zhì)中的溶解度，采用溶出儀法分別考察燈盞

5、花素原料藥粉末，燈盞花素包合物和燈盞花素包合物脂質(zhì)體的體外釋藥行為，繪制體外釋放曲線，進(jìn)行模型擬合，探討體外釋藥機(jī)理。
　　將10只大鼠隨機(jī)分為燈盞花素原料藥溶液對(duì)照組和燈盞花素DCL給藥組，考察單劑量靜脈注射給藥后的藥動(dòng)學(xué)行為。建立大鼠血漿中燈盞花乙素濃度測(cè)定的高效液相色譜法，大鼠給藥后按安排的時(shí)間點(diǎn)取血，測(cè)定藥物濃度后繪制藥時(shí)曲線，利用PK-Solver軟件進(jìn)行房室模型擬合，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，初步探討其在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特征。

6、r>　　將制備的燈盞花素包合物脂質(zhì)體放置于不同的溫度及光照條件下，測(cè)定其包封率并觀察外觀，對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行初步考察。
　　結(jié)果:
　　建立了測(cè)定燈盞花素中燈盞花乙素濃度的高效液相色譜法，以燈盞花乙素濃度為指標(biāo)，測(cè)定了燈盞花素在不同溶劑中的溶解度，并繪制了β-環(huán)糊精對(duì)燈盞花素的增溶曲線。采用飽和水溶液法制備了燈盞花素包合物，單因素考察了制備包合物過(guò)程中對(duì)包封率影響較大的因素，利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定最優(yōu)處方為主客分子比為1∶2，包合

7、時(shí)間為2h，包合溫度為60℃。采用薄膜分散法制備了燈盞花素包合物脂質(zhì)體，并考察了超速離心法和超濾法測(cè)定包合物脂質(zhì)體的包封率。單因素考察了對(duì)包封率影響較大的因素，分別為磷脂/藥物（m/m，X1）和磷脂/膽固醇（m/m，X2），經(jīng)過(guò)星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)化了處方，最優(yōu)處方為蜀=64.82，X2=6.25，按最優(yōu)處方制備三批包合物脂質(zhì)體，OD值為0.878±0.03。
　　以燈盞花乙素的濃度為指標(biāo)，采用溶出儀法，考察了燈盞花素在不同溶

8、出介質(zhì)中的溶解度及燈盞花素溶液、燈盞花素包合物及燈盞花素包合物脂質(zhì)體的體外釋放行為。結(jié)果顯示燈盞花素包合物脂質(zhì)體具有明顯的緩釋作用。
　　體內(nèi)房室模型擬合結(jié)果顯示，燈盞花素包合物脂質(zhì)體符合兩室模型，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為1229.11mm·μg·mL-1，是燈盞花素溶液的21.76倍，消除半衰期為t1/2β，約為燈盞花素溶液的2倍，表明燈盞花素包合物脂質(zhì)體具有明顯的緩釋作用。
　　穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，光照和溫度對(duì)燈盞花素