吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體的制備與評價.pdf

1、目的：吉非替尼（gefitinib，GFB）是一種新型抗非小細(xì)胞肺癌藥物，其作為選擇性表皮生長因子(EGFR)酪氨酸激酶抑制劑，可以降低酪氨酸激酶活性，阻斷EGFR參與的腫瘤細(xì)胞間信息傳遞，從而抑制腫瘤細(xì)胞的生存、繁殖以及轉(zhuǎn)移，以起到抗腫瘤的作用。目前已上市的吉非替尼制劑為片劑，且存在口服吸收緩慢、體內(nèi)分布廣泛、胃腸道不良反應(yīng)程度隨給藥劑量增加而加重的問題。脂質(zhì)體（liposo me）作為一種新型藥物載體，由于其良好的生物兼容性與可修飾

2、潛力，逐漸成為抗腫瘤藥物制劑研究領(lǐng)域的熱點。本實驗采用薄膜分散—凍融法制備吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體，采用羥丙基-β-環(huán)糊精(Hydroxypropyl-β-Cyclodextrin，Hp-β-CD)包合的方式以提高藥物的包封率及穩(wěn)定性，并在制劑處方中加入D-甘露糖與十八胺，使藥物呈現(xiàn)肺部靶向性作用，降低給藥劑量，減少不良反應(yīng)產(chǎn)生概率，提升藥物靶向于肺部腫瘤的治療指數(shù)。
　　方法：在查閱相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，本實驗首先建立了脂質(zhì)體混懸

3、液中、大鼠血漿內(nèi)以及小鼠組織中吉非替尼高效液相色譜法檢測方法，并對該色譜條件進(jìn)行了方法學(xué)考察。結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)及預(yù)實驗結(jié)果，初步確定吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體的制備處方及工藝，以包封率為主要評價指標(biāo)對吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體主要制備處方及工藝因素進(jìn)行考察，探討了對包封率影響較大的處方因素及最佳制備工藝。在單因素實驗考察的基礎(chǔ)上，選擇7個影響因素進(jìn)行了正交實驗，并進(jìn)行極差分析，從而得出最終制備方法。對已制備的吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體進(jìn)行初

4、步的穩(wěn)定性考察及質(zhì)量評價。穩(wěn)定性考察主要包括制劑貯存溫度和滲漏率的考察。質(zhì)量評價主要包括對脂質(zhì)體的外觀、pH值、形態(tài)結(jié)構(gòu)、粒徑分布、表面電位、包封率以及體外釋放度的考察。以吉非替尼溶液作為對照品，對吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體進(jìn)行大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)、小鼠體內(nèi)組織分布研究。在大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究中，以吉非替尼溶液為對照制劑，以吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體為實驗制劑，以SD大鼠為受試動物，采用尾靜脈注射給藥的方法測定血藥濃度并計算藥物動力學(xué)參

5、數(shù)。在小鼠體內(nèi)組織分布研究中，以吉非替尼溶液為對照制劑，以吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體為實驗制劑，以小鼠為受試動物，進(jìn)行組織分布實驗，得出藥物在小鼠體內(nèi)的組織分布情況。
　　結(jié)果：建立了脂質(zhì)體混懸液中、大鼠血漿內(nèi)以及小鼠組織中吉非替尼高效液相色譜法檢測方法，并對該色譜條件進(jìn)行了方法學(xué)考察。結(jié)果表明，吉非替尼專屬性良好，線性關(guān)系、精密度及回收率等指標(biāo)均符合實驗要求。色譜條件如下，色譜柱:Agilent HC-C18柱(4.6×150

6、mm,5μm);保護(hù)柱:通用型保護(hù)柱;流動相:甲醇-10 mmol·L-1乙酸銨水溶液（體積比70∶30）;流速:1.0 mL· min－1;進(jìn)樣量20μL;檢測波長:330nm，柱溫:25℃。以脂質(zhì)體包封率為檢測指標(biāo)，通過單因素考察與正交實驗，最終選擇的制備方法為薄膜分散-凍融法。得到吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體的最佳制備方法如下:主要載體材料為大豆卵磷脂和膽固醇，添加比例為3∶1;吉非替尼∶大豆卵磷脂為1∶20;十八胺∶大豆卵磷脂為1

7、∶15;制備溫度為35℃，水化介質(zhì)為100 mg·mL-1的羥丙基-β-環(huán)糊精，并向其中加入1.5 mg·mL-1的D-甘露糖，水化溫度為25℃;重復(fù)凍融3次后置于4℃貯存。制得的吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體混懸液呈淡黃色，pH值為6.5，粒徑為320.4nm，粒徑分布較為集中，表面電位為+34.29 mV，包封率為51.02％，穩(wěn)定性良好，能夠在4℃下穩(wěn)定保存，混懸液均一穩(wěn)定，30天內(nèi)未出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象，在含30％甲醇的磷酸鹽緩沖溶液釋放介

8、質(zhì)中脂質(zhì)體混懸液釋放速率小于吉非替尼溶液。在大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究中，吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體的AUC值為8.384μg·h·mL-1，MRT值為8.410 h，T1/2β值為5.035h。
　　結(jié)論：吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體混懸液均一穩(wěn)定，在體外釋放實驗中呈現(xiàn)一定緩釋作用。大鼠體內(nèi)實驗結(jié)果表明，制備的吉非替尼肺靶向包合物脂質(zhì)體能夠提升大鼠血漿中藥物濃度，藥物在體內(nèi)的循環(huán)時間得以延長。小鼠組織分布實驗結(jié)果表明，制備的吉非替尼肺