主動(dòng)靶向阿霉素脂質(zhì)體的制備及其體外評(píng)價(jià).pdf

1、當(dāng)下，乳腺癌是最常發(fā)的一種婦科腫瘤，每年因乳腺癌病發(fā)而造成死亡的人數(shù)位居?jì)D科腫瘤首位。手術(shù)治療是乳腺癌臨床治療的首選方案。放療和化療是乳腺癌治療的輔助手段，然而由于腫瘤放化療都會(huì)產(chǎn)生明顯的毒副作用，腫瘤化療具有較強(qiáng)的全身毒性，因此迫切需要探索新的治療手段。
　　整合素受體是在腫瘤細(xì)胞表面高度表達(dá)的一種受體，常見(jiàn)于乳腺癌，膠質(zhì)瘤以及肝癌和黑色素瘤等腫瘤細(xì)胞表面，而在其他正常細(xì)胞表面卻較少表達(dá)，因此整合素受體成為了腫瘤靶向治療的研究熱

2、點(diǎn)。有研究顯示 RGD是整合素受體的特異性配體，RGD肽對(duì)整合素受體具有高效選擇性。八聚精氨酸R8是由8個(gè)精氨酸分子呈鏈狀連接成的細(xì)胞穿膜肽，它能夠高效穿透與之接觸的細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，不具有選擇性。
　　本課題以臨床上常用的腫瘤化療藥物阿霉素為模型藥物，制備了R8-RGD修飾的阿霉素脂質(zhì)體。通過(guò)共價(jià)結(jié)合的方式，將 R8-RGD連接于脂質(zhì)體表面，制備了R8-RGD修飾的載阿霉素脂質(zhì)體。
　　本文的第一部分為MCF-7細(xì)胞的

3、培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組。將實(shí)驗(yàn)室保存的MCF-7細(xì)胞經(jīng)過(guò)復(fù)蘇，傳代培養(yǎng)，凍存等步驟進(jìn)行培養(yǎng)并分組，將MCF-7細(xì)胞隨機(jī)分為PBS組、普通阿霉素脂質(zhì)體組、RGD修飾的阿霉素脂質(zhì)體組、R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體組和RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體組。
　　本文第二部分將制備不同的阿霉素脂質(zhì)體，對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行考察，并在細(xì)胞水平對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)。首先是考察 RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體表征。結(jié)果顯示，制備得到的 RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體呈球形，粒

4、徑較為均一。由于阿霉素本身具有紅色熒光。我們以阿霉素為探針檢測(cè)了乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)于脂質(zhì)體的攝取能力，結(jié)果顯示，乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體的攝取效率顯著強(qiáng)于其他脂質(zhì)體組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P<0.01）。我們進(jìn)一步考察了RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體被MCF-7細(xì)胞攝取的機(jī)制。結(jié)果顯示：MCF-7細(xì)胞對(duì)RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體的攝取是一個(gè)溫度、能量和電荷依賴的由網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的攝取過(guò)程。我們將載藥后的