阿霉素?zé)崦糁|(zhì)體穿越血腦-血瘤屏障的研究.pdf

1、本研究通過使用一種新型的藥物遞送系統(tǒng)——熱敏脂質(zhì)體遞送系統(tǒng),對腦部進行靶向遞送,試圖提高藥物在腦部聚集濃度,增強藥效以及降低對全身的毒副作用。由于腦部存在血腦屏障,使得大部分藥物無法透過,因而無法起到治療作用,這也是困擾腦部疾病治療的難題之一。
　　 以提高藥物的血腦屏障透過性為目的,將藥物制成熱敏脂質(zhì)體包裹形式,利用熱敏脂質(zhì)體的熱敏釋藥特性,提高其包裹藥物的腦部靶向性;同時考察了熱敏脂質(zhì)體作為腦部藥物遞送的可能性及機制。

2、>　　 體內(nèi)血腦屏障透過實驗成本高、實驗周期長、易受多種不確定因素的影響,因此我們選擇先建立體外細胞模型,對體內(nèi)血腦屏障進行模擬,在此基礎(chǔ)上對遞送系統(tǒng)進行篩選優(yōu)化。通過實驗摸索,建立了基于正常星形膠質(zhì)細胞的體外血腦屏障模型和基于膠質(zhì)瘤細胞系的血瘤屏障模型,分別用于模擬正常狀況下的血腦屏障和病理狀況下的血瘤屏障。
　　 建立體外血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)模型和體外血瘤屏障(blood-braint

3、umor barrier,BTB)模型,檢測阿霉素兩種劑型(Thermosensitive liposome.Adriamycin,ts-lip-ADM和阿霉素溶液)在37℃/42℃條件下對兩種模型的穿透性,為阿霉素?zé)崦糁|(zhì)體腦靶向藥物遞送研究奠定基礎(chǔ)。采用人臍靜脈內(nèi)皮細胞系ECV304和星形膠質(zhì)細胞(Astrocytes,As)接觸共培養(yǎng)建立共培養(yǎng)BBB模型;ECV304細胞和膠質(zhì)瘤細胞系C6非接觸共培養(yǎng)建立共培養(yǎng)BTB模型。測定模型

4、的跨內(nèi)皮阻抗值(Trans-endothelialelectrical resistance,TEER)和阿霉素通透性確證模型建立。建模第7天,測定阿霉素兩種劑型在37℃/42℃條件下對兩種模型的透過性(Papp)。BBB模型的TEER值顯著高于BTB模型,對ADM的透過量低于BTB模型。42℃加熱條件下熱敏脂質(zhì)體在BBB和BTB模型中的藥物透過量顯著高于阿霉素溶液。熱敏脂質(zhì)體結(jié)合加熱處理可以顯著促進阿霉素穿越體外血腦/血瘤屏障。

5、>　　 在體外實驗的基礎(chǔ)上,接著進行了一系列的體內(nèi)實驗,作為對體外實驗的驗證和補充。首先進行了活體成像實驗,對熱敏脂質(zhì)體的腦部靶向性進行定性研究。實驗結(jié)果顯示,熱敏脂質(zhì)體結(jié)合熱療,具有一定的腦部靶向性,帶有熒光探針的熱敏脂質(zhì)體在加熱后在腦部聚集。推測熱敏脂質(zhì)體能夠提高藥物對血腦屏障的透過性。由于實驗條件和時間的限制,沒有建立腦部膠質(zhì)瘤體內(nèi)模型,只能通過對昆明小鼠腿部的腫瘤模型進行藥效學(xué)研究。結(jié)果顯示熱療結(jié)合熱敏脂質(zhì)體技術(shù)可以在機體的局