磁性納米脂質(zhì)體跨脊髓損傷大鼠血脊髓屏障的研究.pdf

1、[目的]
　　 磁性納米脂質(zhì)體作為一種藥物載體,通過(guò)尾靜脈注入后跨越脊髓損傷大鼠血脊髓屏障,觀(guān)察在脊髓損傷局部的聚集和彌散情況,探討其在生物體內(nèi)的安全性和生物相容性。
　　 [方法]
　　 1.制備新型的磁性納米脂質(zhì)體,按照制備濃度將48只成年Wistar大鼠隨機(jī)分為4組:高濃度組7.5mg/ml,中濃度組3.25mg/ml,低濃度組1.625mg/ml以及對(duì)照組。將制備的磁性納米脂質(zhì)體按照規(guī)定劑量(分別為100

2、mg/kg,50mg/kg,25mg/kg)經(jīng)尾靜脈注入大鼠體內(nèi),對(duì)照組以同樣方法注入生理鹽水,觀(guān)察注射后7d內(nèi)大鼠一般情況變化,并通過(guò)HE染色、普魯士藍(lán)染色觀(guān)察磁性納米脂質(zhì)體對(duì)大鼠各臟器毒性的影響。
　　 2.通過(guò)反向蒸發(fā)法制備新型磁性納米脂質(zhì)體,通過(guò)表面功能基團(tuán)連接TAT(transactivatorprotein)、PEG(polyethyleneglyc01)而形成TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體,使其兼?zhèn)淇缒すδ?、長(zhǎng)循環(huán)

3、功能及核磁活體示蹤功能；36只成年Wistar大鼠以ImpactorModel-Ⅱ法建立T10急性脊髓損傷模型,隨機(jī)分為3組,A組:PEG-磁性納米脂質(zhì)體組,B組:TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體組,并設(shè)立對(duì)照組,各組均12只。將制備出的TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體,通過(guò)尾靜脈注入B組大鼠脊髓損傷模型體內(nèi)(劑量:4.55mg/kg,1次/天×3),將PEG-磁性納米脂質(zhì)體按同樣劑量尾靜脈注入A組大鼠體內(nèi),對(duì)照組尾靜脈注入等量生理鹽水,通

4、過(guò)MRI動(dòng)態(tài)觀(guān)察TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體在脊髓損傷局部的聚集與擴(kuò)散情況、通過(guò)普魯士藍(lán)、電鏡、火焰原子吸收分光光度法檢測(cè),進(jìn)一步分析其在脊髓損傷局部的聚集情況。
　　 [結(jié)果]
　　 1.尾靜脈注射后7d內(nèi)大鼠一般情況良好,各組大鼠各臟器普魯士藍(lán)、HE染色與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異,僅在高濃度組大鼠肝組織切片中發(fā)現(xiàn)少量的普魯士藍(lán)染色陽(yáng)性顆粒。
　　 2.TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體可以跨越血脊髓屏障聚集在脊髓損

5、傷局部,MRI動(dòng)態(tài)觀(guān)察顯示,這種藥物載體逐漸在損傷局部濃集,主要呈現(xiàn)T2WI低信號(hào)。普魯士藍(lán)染色觀(guān)察到聚集在損傷局部組織的藍(lán)染Fe3O4顆粒,電鏡進(jìn)一步觀(guān)察到脊髓組織神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)聚集的鐵顆粒,火焰原子吸收分光光度法分析顯示TAT-PEG-磁性納米脂質(zhì)體組脊髓損傷局部鐵元素含量相對(duì)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.該磁性納米脂質(zhì)體毒性小,尤其在濃度小于7.5mg/ml(24h劑量小于100m