鹽酸拓撲替康脂質(zhì)體的制備及體內(nèi)外評價.pdf

1、鹽酸拓撲替康(Topotecan，TPT)是喜樹堿的一種半合成衍生物，具有良好的水溶性以及抗腫瘤活性。作為拓撲異構(gòu)酶抑制劑，其結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酯環(huán)與藥理作用密切相關(guān)。與其他拓撲異構(gòu)酶酶抑制劑一樣，TPT的內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性與pH值有關(guān)，在pH較高的條件下會轉(zhuǎn)變?yōu)轸人猁}形式，從而失去活性。將藥物與大分子藥物載體通過共價鍵或者非共價鍵結(jié)合后可以有效增加內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定性。脂質(zhì)體作為藥物傳遞與釋放載體，可以有效地提高藥物穩(wěn)定性、對藥物有緩釋作用，同時脂質(zhì)體制

2、劑還具有一定的靶向性，可以增加細胞對藥物的攝取，提高藥效。本文采用硫酸銨梯度法制備了鹽酸拓撲替康長循環(huán)脂質(zhì)體，從體內(nèi)、體外等方面對脂質(zhì)體制劑進行了評價，考察了脂質(zhì)體制劑對藥物穩(wěn)定性、細胞毒性、藥動學(xué)以及組織分布方面的改進。
　　本文分別采用HPLC方法以及凝膠色譜法用來測定脂質(zhì)體制劑的藥物含量以及包封率，并對建立的方法進行了考察，表明所建立的方法能夠準確地測定鹽酸拓撲替康脂質(zhì)體中藥物的含量以及包封率。
　　以氫化磷脂(HSP

3、C)、膽固醇以及聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)為材料，采用硫酸銨梯度法制備TPT脂質(zhì)體，以包封率為考察指標，對制備脂質(zhì)體的處方以及工藝進行優(yōu)化以及篩選，包括磷脂與膽固醇比例、藥物與磷脂比例、硫酸銨濃度、空白脂質(zhì)體粒徑大小以及水浴孵育時間和溫度，從而確定最佳的處方以及制備工藝。
　　對制備的脂質(zhì)體制劑的外觀、粒徑分布及均勻度、制劑在體外的釋放以及在不同稀釋液中穩(wěn)定性進行了考察。脂質(zhì)體的平均粒徑為69.63±5.3

4、3 nm;多分散指數(shù)為0.117;平均包封率為93.14±1.52％;體外需要144h才能完全釋放出來，表明具有明顯的緩釋作用;初步穩(wěn)定性表明，TPT脂質(zhì)體在4℃條件下放置3個月的穩(wěn)定性良好，含量、有關(guān)物質(zhì)、包封率、粒徑分布及pH值均無明顯改變。
　　體外細胞毒性表明鹽酸拓撲替康脂質(zhì)體以及游離藥物高濃度時對A549細胞有生長抑制作用，脂質(zhì)體的細胞毒性稍優(yōu)于游離藥物，其IG0值分別為18.22和31.25μg·mL-1，同時，從細胞

5、凋亡、周期、壞死等方面對鹽酸拓撲替康脂質(zhì)體的作用機理進行了研究，結(jié)果表明，脂質(zhì)體制劑能夠促進細胞的凋亡和壞死，將細胞阻滯在S期和G2/M期。
　　體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布表明，鹽酸拓撲替康在動物體內(nèi)沒有蓄積作用，與游離藥物相比，脂質(zhì)體制劑顯著增加了藥物在血液中的循環(huán)時間，血漿AUC是游離組的61.17倍，同時，脂質(zhì)體制劑還改變了藥物在小鼠體內(nèi)的分布情況，通過PEG修飾，減低了肝臟、脾臟對藥物的攝取，在肺部的聚集量增加，顯示具有一定的肺