去腎交感神經對青年自發(fā)性高血壓大鼠血壓及靶器官的影響.pdf

1、目的：高血壓作為一種全球流行性疾病,已有相關研究表明交感神經和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的激活在高血壓的發(fā)生和發(fā)展中起著極其重要的作用。應用藥物可抑制交感神經和RAAS系統(tǒng)的過度激活以起到降壓的作用，但需要長期服用，并存在藥物副反應。近年來，國內外的研究表明，采用經皮導管去腎交感神經射頻消融術（RFA）可有效的抑制交感神經和RAAS系統(tǒng)的過度激活使血壓下降，達到治療頑固性高血壓的目的，進而使靶器官獲益。由于這是一項治療頑固

2、性高血壓的新技術，是在傳統(tǒng)方法上的突破和創(chuàng)新，需要大量的基礎以及臨床研究來證明其安全有效性。已有研究顯示該項技術可以使得自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）的血壓下降將近40mmHg。本研究旨在觀察SHR去腎交感神經手術前后血壓的變化以及對靶器官的影響，探討去腎交感神經術對 SHR血壓的干預效果及相關靶器官的影響，進而為治療原發(fā)性高血壓提供新的治療方法。
　　方法：將12周齡的青年SHR（n=24）作為研究對象，聯合應用外科手術切除及化學消

3、融方法（10％的苯酚酒精溶液）建立去腎交感神經模型。將其隨機分為去腎交感神經術組（RDN組）和假手術組（Sham組）。相同周齡的WKY大鼠（n=12）為基線對照組。術前及術后每周測量一次血壓及體重至處死前一天。并分別于術后1w、8w、12w隨機處死各組大鼠各4只，分別留取血漿、心臟、腎臟、主動脈。用ELISA法測定血漿中去甲腎上腺素（NE）及血管緊張素II（Ang II）的含量。計算左室質量指數（LVMI）；心肌組織進行HE染色觀察左心

4、室心肌細胞形態(tài)；Western Blot法分別檢測左心室α-MHC和COL I的蛋白表達。腎臟組織進行HE染色觀察腎臟形態(tài)，進行PAS染色觀察腎小球硬化程度；Western Blot法檢測腎臟COL I的蛋白表達。主動脈進行 HE染色觀察主動脈形態(tài)，應用Image-Pro Plus6.0測量血管內徑（Luminal radius,LR）、血管中膜厚度（Media thickness,MT），計算血管中膜厚度/血管內徑（MT/LR）。采用

5、SPSS13.0版軟件進行統(tǒng)計分析，定量資料采用均數±標準差（?x±s）表示，兩組均數間的比較采用t檢驗，多組均數間的比較采用單因素方差分析（one way ANOVA），多個時間點進行的重復測量采用重復測量方差分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1.體重的比較
　　RDN組與Sham組在手術前及術后每周的體重比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。但RDN組與Sham組在手術前及術后每周的體重均低于W

6、KY組（P<0.05）。
　　2.各組收縮壓的測量
　　術前RDN組與Sham組的SBP無統(tǒng)計學差異（175.0±2.8mmHg vs.174.5±2.7mmHg）（P>0.05），且均大于WKY組的SBP（132.2±4.2mmHg）（P<0.05）。與Sham組相比，RDN組的SBP在術后1w、2w、3w、4w、5w均低于Sham組（145.3±1.6mmHg vs.181.0±3.7mmHg,154.8±2.9mmHg

7、 vs.190.4±7.7mmHg,160.3±4.5mmHg vs.196.0±6.4mmHg,166.2±4.3mmHg vs.203.6±8.0mmHg,184.6±3.2mmHg vs.201.5±9.0mmHg）（P<0.05），術后6w及以后各時間點兩組SBP均無明顯差異（P>0.05）。與WKY組相比，RDN組和Sham組各對應時間點的SBP均高于WKY組（P<0.05）。Sham組的SBP術后1w較術前稍升高（181.0

8、±3.7mmHg vs.174.5±2.7mmHg）(P<0.05)，術后2w（190.4±7.7mmHg）與術后1w無明顯變化(P>0.05)，術后3w（196.0±6.4mmHg）較術后2w稍升高（P<0.05），術后3w以后SBP一直維持在較高水平且無明顯變化（P>0.05）。WKY組各個時間點的SBP均無明顯變化（P>0.05）。
　　3.血漿NE含量的變化
　　術后1w RDN組血漿中NE含量與WKY組相比無統(tǒng)計學

9、差異（169.1±3.8pg/ml vs.170.4±3.2pg/ml）（P>0.05），且二者均顯著低于Sham組（222.3±4.2pg/ml）（P<0.05）。術后8w RDN組血漿中NE含量與Sham組相比無統(tǒng)計學差異（231.4±3.8pg/ml vs.234.5±2.7pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（171.3±5.6pg/ml）（P<0.05）。術后12w RDN組血漿中NE含量與Sham組相比無統(tǒng)計學差異

10、（238.6±2.7pg/ml vs.241.1±5.9pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（171.4±5.4pg/ml）（P<0.05）。
　　4.血漿中Ang II含量的變化
　　術后1w RDN組血漿中Ang II含量與WKY組相比無統(tǒng)計學差異（90.0±1.4pg/ml vs.89.3±2.4pg/ml）（P>0.05），且二者均顯著低于Sham組（171.9±2.8pg/ml）（P<0.05）。術后8w

11、 RDN組血漿中Ang II含量與Sham組相比無統(tǒng)計學差異（174.5±2.0pg/ml vs.173.9±1.5pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（90.1±3.2pg/ml）（P<0.05）。術后12w RDN組血漿中Ang II含量與Sham組相比無統(tǒng)計學差異（173.5±1.9pg/ml vs.173.3±2.8pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（90.1±2.9pg/ml）（P<0.05）。
　

12、　5.LVMI的變化
　　RDN組與Sham組相比術后1w、8w、12w的LVMI均無統(tǒng)計學差（P>0.05），但上述兩組LVMI在各自時間點均顯著高于相應WKY組（P<0.05）。
　　6.心肌HE染色觀察三組大鼠心肌細胞形態(tài)學變化
　　WKY組術后1w、8w、12w的心肌細胞大小均正常，排列整齊，心肌細胞核呈橢圓形，居于細胞中央，心肌間質無明顯增生表現。RDN組與Sham組術后1w、8w、12w的心肌細胞均出現不同

13、程度的損傷，表現為心肌細胞肥大且排列較紊亂，心肌間質明顯水腫，部分心肌細胞溶解，周圍結構不清。
　　7.Western Blot法檢測大鼠心臟α-MHC以及COL I的蛋白表達含量與Sham組相比，RDN組術后1w、8w、12wα-MHC的蛋白表達含
　　量無統(tǒng)計學差異（P>0.05），且均低于相同時間點WKY組的蛋白表達含量（P<0.05）。與Sham組相比，RDN組術后1w、8w、12w COL I的蛋白表達含量無統(tǒng)計學

14、差異（P>0.05），且均高于相同時間點WKY組的蛋白表達含量（P<0.05）。
　　8.腎臟HE染色及PAS染色觀察三組大鼠腎臟形態(tài)學變化及腎小球硬化
　　WKY組術后1w、8w、12w的腎小球大小及形態(tài)均正常，腎小管排列規(guī)則。RDN組與Sham組術后1w、8w、12w的個別腎小球皺縮甚至硬化，部分腎小球可見代償性肥大，部分腎小管萎縮。
　　9.Western Blot法檢測腎臟COL I的蛋白表達含量
　　與

15、Sham組相比，RDN組術后1w、8w、12w COL I的蛋白表達含量無統(tǒng)計學差異（P>0.05），且均高于相同時間點的 WKY組的蛋白表達含量（P<0.05）。
　　10.主動脈 HE染色觀察三組大鼠主動脈形態(tài)學變化及相關指標的測量
　　WKY組的主動脈血管內徑（LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術后1w、8w、12w無明顯變化（P>0.05），且內徑及中膜厚度均正常，血管壁細胞排列規(guī)則。Sham組的主動脈血管內徑（

16、LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術后1w、8w、12w逐漸增大（P<0.05），且血管壁細胞排列不規(guī)則，細胞密度減低。RDN組的主動脈血管內徑（LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術后1w、8w、12w逐漸增大（P<0.05），且與相同時間點的Sham組無明顯差別（P>0.05），均大于相同時間點的WKY組（P<0.05）。
　　結論：
　　1.去腎交感神經術對大鼠的生長無影響，但長期高血壓則阻礙大鼠的生長。