酶輔助提取油樟精油及其抗菌活性研究.pdf

1、本論文以宜賓油樟葉為原料，通過酶輔助-水蒸氣蒸餾法提取油樟精油，并考察各因素對提取油樟精油的影響。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法對油樟精油提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并利用最優(yōu)酶輔助條件下用酶輔助-水蒸氣蒸餾法提取精油進(jìn)行動力學(xué)模型分析。用最優(yōu)條件下提取的油樟精油進(jìn)行體外和體內(nèi)抗菌活性研究。主要內(nèi)容如下:
　　1.通過對提取油樟精油的酶輔助條件的單因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，確定了pH值、酶解時間、酶解溫度對油樟精油得率的影響，并對各因素在單因素實(shí)驗(yàn)

2、的基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法進(jìn)行優(yōu)化，以油樟精油的得率為指標(biāo)，得到最佳提取工藝條件為:pH值為5、酶解時間為67min、酶解溫度為48.5℃。在此條件下重復(fù)5次驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，油樟精油得率為4.37％，該得率是未經(jīng)酶預(yù)處理組的1.5倍。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果與回歸方程預(yù)測值吻合性較好，提取工藝條件可靠。
　　2.以油樟精油為研究對象，依據(jù)酶輔助-水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油的動力學(xué)模型:Vt=V∞（1-e-kt）為基礎(chǔ)，通過水蒸氣蒸餾法提取油樟精油實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了

3、動力學(xué)模型。擬合酶輔助-水蒸氣蒸餾法提取精油過程的動力學(xué)模型，用得到的參數(shù)計(jì)算精油模擬提取量與實(shí)驗(yàn)值相吻合，動力學(xué)模型可描述油樟精油酶輔助-水蒸氣蒸餾法提取過程。通過GC/MS檢測分析，蒸餾時間為120min的油樟精油品質(zhì)優(yōu)良，酶輔助-水蒸氣蒸餾提取的最佳蒸餾時間為120min。
　　3.油樟精油通過體外抗菌試驗(yàn)測定各供試菌種抑菌圈直徑大小，得出油樟精油對各供試菌種的抑制敏感程度;pH值改變和熱處理對油樟精油抗菌活性的影響;并對測

4、定其相應(yīng)菌種的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度，發(fā)現(xiàn)其對15種供試菌種都具有一定的抑菌效果，其具有廣譜抗菌性。測得油樟精油對各菌株的最低抑菌濃度和最小殺菌濃度，其中效果最好的是金黃色葡萄球菌和酵母菌。并且在2.0、1.0、0.5μL/mL精油濃度下，隨著培養(yǎng)時間增加，油樟精油對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的作用效果最佳。
　　4.初步研究了油樟精油對小鼠的體內(nèi)抗菌活性，首先經(jīng)過多次菌株毒力試驗(yàn)，確定小鼠致死率維持在80％-100％的稀釋菌液