近親婚配的斑狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良家系中新的CHST6突變及組織病理學(xué)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)選取華中地區(qū)近親結(jié)婚為特點(diǎn)的—斑狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良家系進(jìn)行研究，深入研究該以近親婚配為特點(diǎn)的斑狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良家系中CHST6基因是否發(fā)生了新的突變,以及相關(guān)組織病理學(xué)改變。
　　方法：對(duì)該家系進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查后發(fā)現(xiàn)2名患者,其中男女病人各1人.該斑狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良家系的所有成員都經(jīng)過詳細(xì)的病史詢問、嚴(yán)格的眼科?？茩z查，留存外眼像，并對(duì)先證者行角膜共聚焦顯微鏡檢查。采集7名成員外周血各5mL，提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA，然后對(duì)

2、目的CHST6基因進(jìn)行測(cè)序,CHST6測(cè)序結(jié)果與基因庫(kù)中正常人群CHST6基因序列進(jìn)行比對(duì)，取先證者Ⅱ4術(shù)中切除的角膜病損組織，行常規(guī)病理檢查。
　　結(jié)果：對(duì)該家系所以成員的基本情況和?？茩z查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并對(duì)所有成員的CHST6基因編碼區(qū)進(jìn)行正反雙向測(cè)序，測(cè)序結(jié)果提示在2位患者兩條等位CHST6基因上存在相同的點(diǎn)突變c.1072T>C（Y358H），余表型正常且與先證者有血緣關(guān)系的人員均是該突變基因的攜帶者。共聚焦顯微鏡檢查提示

3、基質(zhì)層內(nèi)有大量的混濁物質(zhì)蓄積，成斑塊狀分布，基質(zhì)纖維斷裂，部分溶解，基質(zhì)細(xì)胞減少。組織病理學(xué)發(fā)現(xiàn)先證者角膜組織灰白色，有大量的淀粉樣異常物質(zhì)沉積，角膜基質(zhì)內(nèi)大量粉紅色物質(zhì)沉積.基質(zhì)纖維紅染,排列紊亂、斷裂。
　　結(jié)論：本研究證實(shí)了近親結(jié)婚家系中2位患者的基因型為隱性純合子,并且兩條等位CHST6基因編碼序列上存在相同位點(diǎn)的突變(1072T>C)，其余家系成員均為該點(diǎn)突變的致病基因攜帶者。該等位基因相同點(diǎn)突變的隱性純合突變是導(dǎo)致該斑