MUC1在IL-13影響的人支氣管上皮細胞分泌細胞因子GM-CSF中的作用.pdf

1、粘蛋白1（MUC1）是一種廣泛表達于各種粘膜上皮細胞和造血干細胞表面的跨膜糖蛋白,主要分布于呼吸道、胃腸道、泌尿生殖道和乳腺等上皮組織，被認為具有保護、潤滑、免疫調節(jié)等多項功能。既往研究表明在各種細菌或病毒所致呼吸道感染與炎癥中，MUC1可能發(fā)揮重要作用。在哮喘發(fā)病機制中，氣道上皮細胞和樹突狀細胞之間存在著的交互對話作用，氣道上皮細胞分泌GM-CSF、TSLP等細胞因子激活樹突狀細胞，從而介導了哮喘的Th2免疫應答。但MUC1是否參與調

2、節(jié)哮喘氣道上皮的功能尚未見報道。
　　目的：
　　探究MUC1在IL-13影響的人支氣管上皮細胞分泌細胞因子GM-CSF中的作用
　　方法：
　　1．分別以不同濃度的IL-13（0，20，40，60ng/ml）刺激人支氣管上皮（16HBE）細胞24小時。ELISA法分別檢測各組上清中細胞因子GM-CSF的濃度。
　　2．以MUC1 siRNA沉默16HBE的MUC1表達，然后IL-13（20ng/ml）刺激

3、細胞24小時。實驗分為6組。1組：正常對照；2組：Scrambled siRNA轉染；3組：MUC1 siRNA轉染；4組：IL-13；5組：Scrambled siRNA轉染+IL-13；6組：MUC1 siRNA轉染+IL-13。Western Blot檢測各組MUC1蛋白的表達；ELISA法分別檢測各組上清中細胞因子GM-CSF的濃度。
　　結果：
　　1．16HBE能分泌GM-CSF；與未受刺激細胞比較，IL-13可

4、降低16HBE分泌GM-CSF（p<0.05）；
　　不同濃度的IL-13（20，40，60ng/ml）刺激后，16HBE分泌GM-CSF的量無明顯差異。（p>0.05）。
　　2．以20ng/ml的IL-13刺激16HBE細胞24h，細胞表達的MUC1蛋白較對照組下降（p<0.05）。
　　3．采用MUC1 siRNA抑制16HBE細胞的MUC1表達，該組GM-CSF的分泌量較相應照組顯著減少（p<0.01）。