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1、吡咯賴(lài)氨酸是自然界中編碼的第22個(gè)氨基酸。在一種被稱(chēng)為甲烷八疊球菌的古細(xì)菌中,它通過(guò)琥珀密碼子UAG被合成進(jìn)參與甲胺代謝途徑的三個(gè)蛋白。UAG編碼吡咯賴(lài)氨酸的過(guò)程需要pylT基因(產(chǎn)生tRNAPyl)和pylS基因(編碼吡咯賴(lài)氨酰-tRNA合成酶)。pylB、pylC和pylD基因是吡咯賴(lài)氨酸合成所必須的,該過(guò)程是非tRNA依賴(lài)的。S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)蛋白PylB介導(dǎo)了賴(lài)氨酸變位酶反應(yīng),使L-賴(lài)氨酸經(jīng)催化產(chǎn)生了3-甲基鳥(niǎo)氨酸
2、,之后3-甲基鳥(niǎo)氨酸與另一分子的L-賴(lài)氨酸在PylC的作用下連接在一起,隨后被PylD氧化,產(chǎn)物脫水成環(huán)最終形成L-吡咯賴(lài)氨酸。我們?cè)诖竽c桿菌中克隆并表達(dá)了Methanosarcinamazei中的pylB、pylC和pylD基因。通過(guò)使用若干種載體,表達(dá)純化了帶有不同tag的這三個(gè)蛋白。為了得到狀態(tài)均一的蛋白樣品,我們還嘗試了不同方法。
Leptosphaeriarhodopsin是一個(gè)微生物視紫質(zhì)家族成員,該家族是一類(lèi)
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