二苯乙烯苷上調HO-1表達負向調控H2O2誘導人臍靜脈內皮細胞凋亡.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、血管內皮細胞凋亡是動脈粥樣硬化形成的重要機制。因此通過藥物干預，抑制其凋亡是防治動脈粥樣硬化的重要策略。二苯乙烯苷（TSG）是一種二苯乙烯苷類化合物，通常從何首烏中提取獲得。本課題組的前期研究表明，TSG可以減少H2O2誘導的人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）的凋亡。但目前還不清楚 TSG是否具有其他的保護機制。本研究旨在研究TSG對外源性H2O2對HUVECs表達血紅素氧合酶-1（HO-1）的影響，并探討其在細胞凋亡中的功能。用300μ

2、mol/L濃度的 H2O2處理體外培養(yǎng) HUVECs，建立內皮細胞凋亡模型。按分組要求，用不同濃度的TSG預處理HUVECs，然后利用實時熒光定量PCR在mRNA水平和Western blot在蛋白水平檢測HO-1的變化情況；比色法測定 HO-1酶活性變化；流式細胞術檢測HUVECs的細胞凋亡；Western blot檢測Nrf2核轉位；干擾RNA及抑制劑分析HO-1對HUVECs凋亡的影響。實時定量PCR結果顯示，陰性對照組HO-1

3、mRNA表達水平極低，H2O2處理后，HO-1僅有輕微增高。而給予不同濃度TSG處理后，HO-1 mRNA的表達與TSG濃度呈正相關。經過不同的處理時間，HO-1 mRNA其表達量不同，6h開始升高，峰值在12h，然后開始下降。HO-1蛋白表達水平與mRNA趨勢一樣。同時，采用RNA合成抑制劑放線菌素D和蛋白質合成抑制劑放線菌酮處理后，HO-1表達顯著降低。此外，TSG能誘導Nrf2核轉位。采用Nrf2siRNA轉染細胞，HO-1表達降

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