FetuiN-A作為疾病標志物對糖尿病腎病的意義.pdf

1、目的:
　　糖尿病腎病(DN)是糖尿病的患者致死、致殘的重要原因,發(fā)病機制至今未明。針對該并發(fā)癥的診斷指標也欠準確,尿微量白蛋白(MAU)是目前臨床診斷的主要診斷依據之一,但敏感性及特異性均不高。尋找新的糖尿病腎病診斷標志物是目前研究熱點之一,包括血清胱抑素C,成纖維細胞生長因子,8-羥基-2'-脫氧鳥苷等等。Fetuin-A在診斷或預測糖尿病腎病的價值頗受矚目,但由于其與多種疾病之間存在不可分割的聯(lián)系,如腎小管異位鈣沉積抑制劑、

2、心腦血管相關疾病及胰島素抵抗問題等等,其與糖尿病腎病之間聯(lián)系雖有探索,但缺乏更加詳實的研究。本研究旨在明確Fetuin-A在2型糖尿病小鼠肝臟腎臟中的分布狀況,并進一步探究Fetuin-A在血液及尿液中的濃度與糖尿病腎病患者病情進展的相關性,試圖發(fā)現(xiàn)其與糖尿病腎病之間的聯(lián)系。
　　實驗對象與方法:
　　1.動物研究
　　選取8周齡雄性非肥胖2型糖尿病老鼠模型Akita小鼠及正常普通老鼠模型BL6小鼠,每組各5只小鼠,體

3、重在16～21g之間,經過普通飲食飼養(yǎng)2周后,乙醚麻醉后處死,獲取兩組小鼠肝臟及腎臟勻漿,提取蛋白質,用Western Blot技術觀察兩組小鼠在肝臟及腎臟中Fetuin-A蛋白的表達情況。
　　2.臨床研究
　　該實驗選擇了648名2型糖尿病合并糖尿病腎病的患者,以尿微量白蛋白/尿肌酐比(UAlb/Cre)的水平作為標準分為三組:A1(＜30 mg/g),A2(30-299mg/g),A3(≥300mg/g);根據估計腎小

4、球濾過率(eGFR)的分期分為4組:G1(＞90ml/min/1.73m2), G2(60-89 ml/min/1.73m2), G3(30-59 ml/min/1.73m2),G4(15-29 ml/min/1.73m2),eGFR＜15 ml/min/1.73m2的患者以及正在接受透析治療的患者被排除在外。收集并記錄所有受試者的年齡、體重指數(shù)(BMI),測量血壓,檢測隔夜空腹總膽固醇水平(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂

5、蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、血肌酐(SCr)、尿肌酐(UCr)、尿素氮(UN)、血漿血糖(PG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(MAU),計算UAlb/Cre(mg/g)、eGFR(ml/min/1.73m2)。采集患者血清、尿液標本冷藏于-80℃冰箱待測,血清及尿液Fetuin-A水平用ELISA方法測定。統(tǒng)計分析采用SPSS統(tǒng)計軟件(IBM ver23.0),進行成組設計的多變量邏輯回歸分析及KW

6、檢驗,P＜0.05被認為具有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.Western blot結果顯示肝臟中Akita小鼠和BL6小鼠的Fetuin-A含量無明顯差異,而Akita小鼠腎臟中的Fetuin-A含量要明顯較BL6小鼠高。
　　2.不同分類的糖尿病腎病基本資料對比情況Kruskal-Wallis檢驗顯示,在UAlb/Cre水平的分期(A1、A2、A3)中,收縮壓、血肌酐、尿素氮、尿酸、eGFR表現(xiàn)出顯著變化(P＜0

7、.001)。在使用eGFR進行的分期(G1、G2、G3、G4)當中,年齡、舒張壓、糖化血紅蛋白、血漿血糖、血肌酐、尿素氮、尿酸、甘油三酯、低密度脂蛋白、UAlb/Cre表現(xiàn)出較為明顯的改變(P＜0.001)。
　　3.糖尿病腎病血清及尿液Fetuin-A與糖尿病代謝及不同腎病嚴重程度指標相關情況
　　糖尿病腎病患者的血清Fetuin-A水平與BMI(r=0.163,P=0.001)、TG(r=0.126,P=0.007)呈正

8、相關,與年齡(r=-0.110,P＜0.001)、HDL-C(r=-0.096,P=0.042)呈負相關,尿液Fetuin-A水平與年齡(r=0.161,P＜0.01)、UAlb/Cre(r=0.397,P＜0.001)、收縮壓(r=0.17,P＜0.001)、BUN(r=0.190,P＜0.001)、SCr(r=0.167,P＜0.001)呈正相關,與eGFR(r=-0.192,P＜0.001)呈負相關。應用Kruskal-Walli

9、s檢驗得出,尿液中的Fetuin-A隨著UAlb/Cre的增加而增加(微量白蛋白尿分類比較,P=1.44×10-24,eGFR分類比較,P=7.12×10-9),而血清中的Fetuin-A沒有顯著變化(P＞0.05)。
　　多重線性回歸逐步回歸法分析發(fā)現(xiàn),TG(β=0.125,P＜0.05)、BMI(β=0.124,P＜0.05)是血清Fetuin-A獨立影響因素,UAlb/Cre(β=0.669,P＜0.001)、eGFR(β=