TGF-β1、CTGF及Fetuin-A在糖尿病大鼠血管鈣化中的作用.pdf

1、目的：研究 TGFβ1、CTGF、Fetuin-A在糖尿病血管鈣化大鼠中的表達情況，探討TGFβ1、CTGF、Fetuin-A對糖尿病血管鈣化的作用。
　　方法：肌注維生素D3加尼古丁灌胃制備大鼠血管鈣化模型，同時腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）誘導糖尿病模型。八周齡健康雄性Wistar大鼠36只共分為四組，即正常對照組（CON）、糖尿病組（DM）、鈣化組（VDN）和糖尿病加鈣化組（DM+VDN）。各組大鼠共同喂養(yǎng)16周后，用免疫組化

2、法檢測轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factorβ1，TGF-β1）、結(jié)締組織生長因子（connective tissuegrowth factor，CTGF）在大鼠血管中的表達，酶聯(lián)免疫吸附法（Elisa）檢測血清胎球蛋白-A（Fetuin-A）表達水平，另外檢測血管鈣含量、血管堿性磷酸酶（ALP）活性和骨鈣素（OC）含量，以及血清各項生化指標，并進行胰腺HE，主動脈HE和Von Kossa染色。
　

3、　結(jié)果：1.在四組大鼠主動脈免疫組化檢測中顯示，DM+VDN組 TGFβ1表達最高，細胞質(zhì)內(nèi)呈現(xiàn)大面積的深棕黃色物質(zhì)；DM+VDN組 CTGF表達最高，細胞質(zhì)內(nèi)呈現(xiàn)大量棕黃色物質(zhì)。與CON組比較，DM+VDN組血清Fetuin-A表達降低25.20％（P＜0.05），VDN組血清Fetuin-A表達降低21.45%（P＜0.05）。2.DM+VDN組和VDN組大鼠血管鈣含量（122.9±37.23和80.56±21.42μ mol/mg

4、·dw）較CON組（51.10±12.57μ mol/mg·dw）分別升高1.41倍和57.65%（P＜0.01，P＜0.05），且DM+VDN組血管鈣含量較VDN組高52.56%（P＜0.01）；DM+VDN組血管鈣含量較DM組（59.85±19.40μ mol/mg·dw）高1.05倍（P＜0.01）。DM+VDN組大鼠血管堿性磷酸酶活性（113.6±40.52 U/gprot）較CON組（31.31±15.04 U/gprot）升

5、高2.63倍（P＜0.01），較VDN組（75.75±35.08 U/gprot）升高49.97%（P＜0.05），較 DM組升高2.13倍（P＜0.01）。3.DM+VDN組和DM組大鼠空腹血糖均顯著升高，DM+VDN組大鼠空腹血糖較CON組升高3.65倍（P＜0.01），較VDN組升高3.31倍（P＜0.01）；DM組大鼠空腹血糖較CON組升高3.73倍（P＜0.01），較VDN組升高3.39倍（P＜0.01）。DM+VDN組血清胰

6、島素水平明顯降低，較CON組降低68.07%（P＜0.05），較VDN組降低63.72%（P＜0.05）；DM組胰島素水平較CON組降低51.58%（P＜0.05）。4.胰腺HE染色在DM組和DM+VDN組均可見胰島體積縮小，中心空泡化；主動脈HE染色在VDN組和DM+VDN組均可見內(nèi)膜損傷；而主動脈Von Kossa染色在VDN組和DM+VDN組則可見中膜鈣沉積。
　　結(jié)論：上述實驗結(jié)果表明糖尿病可以加重血管鈣化，在糖尿病血管鈣