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1、腦動(dòng)靜脈畸形(cerebral arteriovenous malformations,cAVM)是神經(jīng)外科常見(jiàn)的腦血管疾病之一,也是青少年致殘、致死的危險(xiǎn)因素。它是由異常的動(dòng)脈和靜脈血管連接形成,中間沒(méi)有毛細(xì)血管網(wǎng)及神經(jīng)組織[1]。動(dòng)靜脈畸形由供血?jiǎng)用}、畸形團(tuán)、引流靜脈組成的異質(zhì)血管病變,其位置、大小、引流靜脈多種多樣,在普通人群的發(fā)病率低于1%,多見(jiàn)于額葉、顳葉、頂葉,其它部位如枕葉、小腦、腦干也有發(fā)生。腦動(dòng)靜脈畸形可無(wú)癥狀,也可出
2、現(xiàn)反復(fù)的顱內(nèi)出血、癲癇發(fā)作、頭痛、頭暈等臨床癥狀。目前動(dòng)靜脈畸形的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為,動(dòng)靜脈畸形是一種先天性病變,在胚胎發(fā)育的第3周時(shí),原始腦血管開(kāi)始分化為動(dòng)脈、靜脈及毛細(xì)血管網(wǎng),此時(shí)動(dòng)脈和靜脈并行排列,鄰接緊密,若血管發(fā)育受阻,動(dòng)靜脈之間就會(huì)形成溝通,形成動(dòng)靜脈畸形。在以往的研究中發(fā)現(xiàn),腦動(dòng)靜脈畸形團(tuán)的動(dòng)脈部分已經(jīng)發(fā)育成熟,而靜脈部分的血管還停留在胚胎時(shí)期,認(rèn)為畸形是由靜脈發(fā)育障礙引起的。對(duì)手術(shù)切除腦動(dòng)靜脈脈畸形(cA
3、VM)組織的研究表明,畸形的產(chǎn)生是一個(gè)活躍的血管生成和炎癥過(guò)程,而不是一個(gè)靜態(tài)的先天性異常。幾組研究顯示[2、3]動(dòng)靜脈畸形的突出特征是,血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的mRNA和蛋白水平的相對(duì)高表達(dá)。根據(jù)動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn),VEGF增加了動(dòng)靜脈畸形出血的傾向。在動(dòng)靜脈畸形培養(yǎng)出的內(nèi)皮細(xì)胞中,血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)水平升高,VEGF-1和VEGF-2與對(duì)照的內(nèi)皮細(xì)胞相比表達(dá)顯著升高。RNA結(jié)合基序蛋白3(RNA-bindin
4、g motif protein3,RBM3)屬于高度保守的RNA結(jié)合蛋白家族成員之一,是一種重要的冷休克蛋白,存在于哺乳動(dòng)物的細(xì)胞中,在低溫、缺血、缺氧等環(huán)境刺激其表達(dá)量升高[4]。RBM3可增強(qiáng)COX-2、IL-8、VEGF mRNA的穩(wěn)定性和翻譯[5]。而腦動(dòng)靜脈畸形的血管團(tuán)長(zhǎng)期處于高血流、高壓力的狀態(tài)下,繼發(fā)畸形團(tuán)的“盜血”現(xiàn)象,引起周?chē)X組織缺血、缺氧,刺激組織分泌相關(guān)因子,所以我們推測(cè)正是由于這些因素和相關(guān)因子的相互作用,促進(jìn)
5、動(dòng)靜脈畸形的血管再生和重塑。
目的:通過(guò)檢測(cè)RNA結(jié)合基序蛋白R(shí)BM3、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子VEGF在動(dòng)靜脈畸形患者畸形團(tuán)中的表達(dá)情況,結(jié)合患者臨床和影像學(xué)特征,探討RBM3、VEGF在畸形團(tuán)中的表達(dá)情況與腦動(dòng)靜脈畸形血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)性,闡明RBM3、VEGF之間的關(guān)聯(lián)性及其調(diào)控血管發(fā)育的作用,為動(dòng)靜脈畸形的分子生物學(xué)研究提供新的思路。
方法:選取經(jīng)數(shù)字減影血管造影術(shù)(DSA)、核磁共振成像(MRI)和病理切片明確診斷
6、的動(dòng)靜脈畸形患者的畸形團(tuán)35例,以及癲癇患者腦組織6例,腦動(dòng)靜脈畸形和癲癇患者均為北京天壇醫(yī)院神經(jīng)外科行手術(shù)治療。通過(guò)計(jì)算腦動(dòng)靜脈畸形患者DSA圖像上供血?jiǎng)用}與引流靜脈出現(xiàn)的時(shí)間間隔(A-V),將患者按血流動(dòng)力學(xué)的不同分為兩組:高流量組(A-V≤2幀)(Fig.1),19例;低流量組(A-V>2幀)(Fig.2),16例。將術(shù)中獲取的畸形團(tuán)和腦組織進(jìn)行石蠟包埋及切片,取同一組織相鄰兩張切片,分別對(duì)標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)方法染色并檢測(cè)RBM
7、3、VEGF的表達(dá)。然后通過(guò)SPSS19.0進(jìn)行RBM3、VEGF的表達(dá)水平在動(dòng)靜脈畸形的差異性表達(dá)和關(guān)聯(lián)性分析。
結(jié)果:(1)RBM3在動(dòng)靜脈畸形低流量組(24.4%)和高流量組(36.6%)的陽(yáng)性表達(dá)率均高于正常腦血管內(nèi)皮細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)率,且差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(Table1);RBM3在動(dòng)靜脈畸形低流量組和高流量組的表達(dá)差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(Table2);通過(guò)關(guān)聯(lián)性分析,結(jié)果P<0
8、.01,認(rèn)為RBM3的表達(dá)水平與腦動(dòng)靜脈畸形異常血管團(tuán)的血流動(dòng)力學(xué)具有關(guān)聯(lián)性,其關(guān)聯(lián)系數(shù)為C=0.672。(2)RBM3在動(dòng)靜脈畸形出血組和未出血組的差異表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(Table3)。(3) VEGF在動(dòng)靜脈畸形低流量組和高流量組的陽(yáng)性表達(dá)率,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(Table4);VEGF在動(dòng)靜脈畸形出血組和未出血組的差異表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(Table5)。(4) RBM3和VE
9、GF在腦動(dòng)靜脈畸形組織中表達(dá)的相關(guān)性:經(jīng)檢驗(yàn),RBM3和VEGF在腦動(dòng)靜脈畸形組織中的蛋白表達(dá)無(wú)相關(guān)性(P>0.05)(Table6)。
結(jié)論:(1)RBM3在正常腦組織血管不表達(dá)或低表達(dá),而在動(dòng)靜脈畸形中高表達(dá)并且隨畸形流量升高其表達(dá)量也隨之升高。表明RBM3與動(dòng)靜脈畸形的發(fā)生有關(guān),并且其表達(dá)量受血管畸形血流動(dòng)力學(xué)的影響。RBM3在腦動(dòng)靜脈畸形出血組與未出血組之間的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明RBM3的表達(dá)與畸形是否出血無(wú)關(guān)。(2
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