活性維生素D對高血壓腎損害大鼠足細胞的保護作用.pdf

1、背景及目的:高血壓病(Hypertension)是臨床常見病及多發(fā)病，可造成心、腦、腎等多器官的損害，高血壓腎病(Hypertensive nephropathy)是其主要并發(fā)癥及致死因素之一。尿中出現(xiàn)微量蛋白是高血壓腎病早期的敏感指標。足細胞(podocyte)是位于腎小球基底膜(GBM)外側(cè)的一種高度分化細胞，作為腎小球濾過膜的重要組成部分起著舉足輕重的作用，足細胞的損傷與尿微量蛋白的出現(xiàn)關(guān)系密切，高血壓腎病早期即存在足細胞損傷、凋

2、亡、脫落，說明足細胞的損傷機制對于發(fā)現(xiàn)高血壓腎病新治療靶點具有重要意義。活性維生素D(1，25(OH)2D3)是維持體內(nèi)鈣磷代謝和骨骼系統(tǒng)正常功能的重要調(diào)節(jié)因素。近期研究發(fā)現(xiàn)1，25(OH)2D3除了具有以上經(jīng)典的作用還具有多重的免疫調(diào)節(jié)作用、抑制RASS的活性、調(diào)控肌肉功能、調(diào)節(jié)胰島素分泌、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的功能等等。越來越多的研究顯示1，25(OH)2D3具有獨立的腎臟保護作用，可以減輕繼發(fā)性腎損害，降低蛋白尿。但其對高血壓腎病是否具有

3、保護作用及作用機制尚不清楚。本實驗通過對自發(fā)性高血壓大鼠(SpontaneouslyHypertensive Rat，SHR)給予1，25(OH)2D3干預(yù)，觀察其對大鼠血壓、腎功能、血鈣、血清白蛋白、24H尿蛋白、腎小球病理變化，以及足細胞蛋白(Nephrin、WT1)和維生素D受體(VDR)表達的影響，探討1，25(OH)2D3對高血壓腎病足細胞的保護作用及其可能機制，從而為深入闡明1，25(OH)2D3對高血壓腎病的保護機制提供新

4、的依據(jù)。
　　方法:將18只SHRs，適應(yīng)性的喂養(yǎng)1周后，隨機分為高血壓組(H，n=9)、骨化三醇組(D，n=9)，選取正常Wistar大鼠為正常對照組(NS，n=8)，D組給予1，25(OH)2D33ng/(100g*d)灌胃，H及NS組給予等量3DW灌胃，總療程16周。治療期間每4周采用尾動脈測壓法測量大鼠血壓。16周后處死各組大鼠，處死之前留取24H尿，測定24H尿蛋白;頸動脈采血，測定血清VitD、血清白蛋白、血鈣、血肌酐

5、;腎組織做PAS染色，觀察腎小球病理改變;應(yīng)用蛋白印跡法、免疫組化方法檢測大鼠腎臟Nephrin、WT1及VDR等蛋白的表達。
　　結(jié)果:
　　1.各組大鼠一般情況變化:D組與H組在治療前后血壓無明顯變化。各組大鼠血肌酐水平無明顯變化，與NS組比較:H組血鈣、血清白蛋白及血清VitD明顯下降，D組與H組相比以上指標明顯升高，與NS組相比無明顯變化，H組24H尿蛋白較NS組明顯增多，D組與H組相比24H尿蛋白明顯降低。

6、　　2.各組大鼠腎臟病理改變:NS組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)清晰，未見腎小球及腎小管結(jié)構(gòu)損傷，H組可見腎小球球囊粘連、局灶節(jié)段硬化及系膜區(qū)細胞增生，D組與H組相比，腎小球損傷明顯減輕。
　　3.Western blot結(jié)果及免疫組化的結(jié)果顯示:與NS組比較，腎組織蛋白Nephrin，WT1和VDR的表達在H組明顯減少，與H組比較D組上述蛋白的表達明顯增加。
　　結(jié)論:1.1，25(OH)2D3無明顯的降壓作用，對SHR腎功能無明顯影響。