腎素原受體在高血壓大鼠致心肌損害中的作用機制.pdf

1、目的：利用腹主動脈縮窄型高血壓大鼠，觀察心肌組織中磷脂酶C-β3（PLC-β3）在腎素原受體（(P)RR）所致的心肌損害中的作用，檢測PLC-β3及其下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子表達、活性及作用機制，為更深入的了解高血壓的發(fā)病機制提供理論依據(jù)。
　　方法：選取50只雄性SD大鼠，使用常規(guī)的腹主動脈縮窄術(shù)制備高血壓大鼠動物模型，50只大鼠隨機分為5組，每組10只，假手術(shù)組（C）、高血壓組（AL）、U73122組（U）、HRP組（H）、U731

2、22組和HRP組（U+H），上述治療時間為4周。期間測定大鼠尾動脈血壓并記錄。治療實驗結(jié)束后進行如下檢測：RT-PCR檢測心肌組織中(P)RR、PLC-β3及下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子的mRNA表達；Western blott檢測心肌組織中(P)RR、PLC-β3及下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子的蛋白表達；放射免疫分析法分別測定心肌組織中AngⅠ及AngⅡ的濃度。
　　結(jié)果：1、大鼠血壓測量：與C組（100±3mmHg）相比，高血壓組大鼠動脈血壓明顯

3、升高（P<0.05）。給予U組、H組藥物及U和H聯(lián)合治療后，與AL組（155±5mmHg）比較，U組（128±5mmHg）、H組（131±6mmHg）及U+H組（126±6 mmHg）血壓均明顯降低（P<0.05），但是仍然高于C組。2、心肌組織(P)RR、PLC-β3、PKC-α、ERK1、ERK2、Raf-1及PKC-ε的mRNA水平檢測：(P)RR mRNA表達水平,與C組相比，AL組大鼠(P)RR mRNA水平明顯升高，差異有統(tǒng)

4、計學(xué)意義（P<0.01）。與AL組相比，運用U73122、HRP單獨治療以及U73122和HRP聯(lián)合治療后，(P)RR mRNA水平明顯降低（P均<0.01）。PLC-β3 mRNA表達水平,與作為空白對照的C組相比，AL組大鼠心肌組織PLC-β3 mRNA水平明顯升高（P<0.01）。與AL組相比較，藥物干預(yù)的U組、H組和U+H組大鼠心肌組織PLC-β3 mRNA水平顯著降低（P<0.05）。PKC-αmRNA表達水平,與C組相比，A

5、L組大鼠心肌組織PKC-αmRNA水平明顯升高（P<0.05）。與AL組相比，藥物干預(yù)的U組、H組和U+H組大鼠心肌組織PKC-αmRNA水平顯著降低（P<0.05）。 ERK1 mRNA表達水平,與C組相比，AL組大鼠心肌組織ERK1 mRNA水平明顯升高（P<0.01）。與AL組相比，U組ERK1 mRNA水平變化不明顯，但H組和U+H組ERK1 mRNA水平明顯減低（P<0.05）。ERK2 mRNA表達水平,與C組相比，AL組大

6、鼠心肌組織ERK2 mRNA水平顯著升高（P<0.01）。與AL組相比，藥物干預(yù)的U組、H組和U+H組大鼠心肌組織ERK2 mRNA水平顯著降低（P<0.05）。Raf-1 mRNA表達水平,與C組相比，AL組大鼠心肌組織Raf-1 mRNA水平明顯升高（P<0.01）。與AL組相比，藥物干預(yù)的U組、H組和U+H組大鼠心肌組織Raf-1 mRNA水平顯著降低（P<0.05）。PKC-εmRNA表達水平,與作為空白對照的C組相比，AL組大

7、鼠心肌組織PKC-ε mRNA水平明顯降低（P<0.05）。與AL組相比較，H組PKC-ε mRNA水平變化不明顯，但U組和U+H組PKC-εmRNA水平明顯升高（P<0.05）。3、心肌組織(P)RR、PLC-β3、PKC-α、ERK1/2、Raf-1及PKC-ε的的蛋白表達水平檢測：(P)RR蛋白表達水平,與C組相比，AL組大鼠心臟組織(P)RR蛋白表達水平明顯升高（P<0.05）。與AL組相比，藥物干預(yù)的U73122組、HRP組和

8、U73122+HRP組大鼠心肌組織(P)RR蛋白表達水平顯著降低（P均<0.01）。PLC-β3蛋白表達水平,與C組相比，AL組大鼠心肌組織PLC-β3蛋白表達水平明顯升高（P<0.01）。與AL組相比較，藥物干預(yù)的U組大鼠心肌組織PLC-β3蛋白表達水平未發(fā)生明顯變化，H組和U+H組PLC-β3蛋白表達水平顯著降低（P<0.01）。PKC-α蛋白表達水平,與作為空白對照的C組相比，AL組大鼠心肌組織PKC-α蛋白表達水平明顯升高（P<

9、0.01）。與AL組相比較，藥物干預(yù)的U組、H組和U+H組大鼠心肌組織PKC-α蛋白表達水平顯著降低（P<0.05）。ERK1/2蛋白表達水平,與C組相比，AL組大鼠心肌組織ERK1/2蛋白表達水平明顯升高（P<0.05）。與AL組相比較，藥物干預(yù)的U組大鼠心肌組織ERK1/2蛋白表達水平升高（P<0.05），H組ERK1/2蛋白表達水平變化不明顯，但U+H組ERK1/2蛋白表達水平顯著降低（P<0.01）。Raf-1蛋白表達水平,與作

10、為空白對照的C組相比，AL組大鼠心肌組織Raf-1蛋白表達水平明顯升高（P<0.01）。與AL組相比較，U組、H組和U+H組大鼠心肌組織Raf-1蛋白表達水平顯著降低（P<0.01）。PKC-ε蛋白表達水平,與C組相比，AL組大鼠心肌組織PKC-ε蛋白表達水平明顯降低（P<0.01）。與AL組相比較，藥物干預(yù)的H組大鼠心肌組織PKC-ε蛋白表達水平變化不明顯，而U組和U+H組PKC-ε蛋白表達水平顯著升高（P<0.05）。4、血漿Ang

11、 Ⅰ水平檢測：與假手術(shù)組比較，高血壓組大鼠血漿AngⅠ水平降低（P<0.05）。與高血壓組相比較，藥物干預(yù)的U73122組大鼠血漿AngⅠ水平升高（P<0.05）。5、血漿AngⅡ水平檢測：與假手術(shù)組相比，高血壓組大鼠血漿 AngⅡ水平明顯降低（P<0.01）。與高血壓組相比較，藥物干預(yù)的HRP組大鼠血漿AngⅡ水平升高（P<0.01）。
　　結(jié)論：1、高血壓大鼠心臟中(P)RR的表達升高，同時PLC-β3的表達升高，應(yīng)用(P)R

12、R特異性抑制劑HRP可降低受體本身及PLC-β3表達，推測PLC-β3可能是(P)RR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的一個重要因子。2、腎性高血壓大鼠心臟中PKC-α、ERK1/2、Raf-1表達均升高，應(yīng)用HRP和U73122及聯(lián)合治療后，表達水平均出現(xiàn)不同程度的降低，表明激活PKC-α、ERK1/2、Raf-1等下游因子參與心肌組織損害過程。3、在本模型動物高血壓發(fā)生發(fā)展過程中，心肌組織PRR首先被激活，引起心肌PLC-β3表達升高，從而導(dǎo)致下游的PK

13、C-α、ERK1/2、Raf-1等信號因子表達增加，最終誘導(dǎo)心肌損害的發(fā)生。4、應(yīng)用HRP和U73122治療，引起心肌組織PRR、PLC-β3、PKC-α、ERK1/2、Raf-1等因子表達水平降低，并伴有血壓下降，表明阻斷此信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可逆轉(zhuǎn)對心血管的損害，起到保護心臟的作用。5、腎性高血壓大鼠心臟中PKC-ε表達降低，用抑制劑治療后出現(xiàn)不同程度的升高，表明PKC-ε與PKC-α不同，可能具有保護心臟的作用。6、抑制或阻斷(P)RR、