富氫水對高膽固醇血癥患者血脂及高密度脂蛋白功能的影響.pdf

1、研究背景:
　　動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是一組稱為動脈硬化的血管病中最常見、最重要的一種。臨床研究表明，異常的脂質(zhì)代謝是AS標志性的危險因素，常見于高膽固醇血癥。高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）具有抗AS的生物學特性，包括抗氧化、抗炎癥、促進膽固醇逆向轉(zhuǎn)運等，其功能與HDL結(jié)構(gòu)、組分和代謝密切相關(guān)。某些代謝性疾病狀態(tài)，如高脂血癥、糖尿病等，可降低HDL的生物學活性

2、，從而加速AS的進程。
　　研究表明，氫氣（H2）是一種新型抗氧化劑，可以減少氧化應激的發(fā)生。吸入氫氣或飲用富含氫氣的液體可治療某些氧化損傷性疾病，如糖尿病、腦卒中、慢性肝炎等。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，通過口服富氫水能夠降低代謝綜合征患者血漿總膽固醇（total cholesterol，TC）和低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）的水平，提高HDL功能。我們團隊前期的研究

3、為飲水前后對照，含非盲性試驗設(shè)計，無安慰劑組作為對照，其研究結(jié)果不能排除氣候變化和受試人員自身因素的影響。
　　研究目的:
　　本研究采用雙盲隨機安慰劑對照試驗，研究富氫水對高膽固醇血癥患者血漿脂蛋白的組分、含量及生物活性的影響，并對飲水前后體內(nèi)pre-β1-HDL水平和pre-β1-HDL依賴的ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）介導的膽固醇溢出能力進行探討。
　　研究對象和方法:
　　1、病例篩選：通過招募泰

4、安市某社區(qū)68名高膽固醇血癥患者（40–60歲）作為受試者，入選標準：TC>5.18mmol／L和/或LDL-C≥2.59mmol／L，并排除繼發(fā)性高膽固醇血癥及患有不適宜參與實驗的疾病。受試者于受試前3個月開始停服調(diào)脂藥及有類似功效的保健食品。在整個試驗過程中保持生活方式及飲食結(jié)構(gòu)不變。
　　（安慰劑組）和實驗組（富氫水組），每組各34例。試驗周期為10周。富氫水組每人每日飲富氫水900mL，安慰劑組每人每日飲安慰劑純凈水900

5、mL，每日三次，每次300ml。血樣采集時間為實驗開始前1天和實驗結(jié)束時。
　　3、采集患者空腹血，自動生化分析儀器檢測血漿TC，甘油三酯（TG），HDL、LDL、VLDL的水平；采用酶法測定血漿葡萄糖（GLU）水平；通過ELISA法檢測血漿中pre-β1-HDL水平；依據(jù)Ly等人的方法檢測血漿游離膽固醇（FC）值來估測內(nèi)源性卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶（LCAT）的水平；通過ELISA法檢測超氧化物歧化酶(SOD)的含量和對氧磷酶-1

6、（PON-1）活性；通過分光光度法測定血漿中丙二醛（MDA）的含量；通過ELISA法對血漿腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細胞介素-6（IL-6）的濃度進行檢測；通過密度梯度離心法分離血脂；通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）來檢測血漿中鞘氨醇-1-磷酸（S1P）和HDL中神經(jīng)酰胺的含量；通過同位素H3檢測HDL對細胞內(nèi)膽固醇流出的影響；通過銅離子誘導的LDL來評價HDL的抗氧化功能；采用MTT法和流式細胞儀法測定 HDL抑制

7、細胞凋亡的功能；通過蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）分析細胞間黏附分子-1（ICAM-1）、血管細胞粘附分子-1（VCAM-1）、及β肌動蛋白（β-actin）抗體的表達；通過Western blot法檢測血漿載脂蛋白ApoB-100、ApoA-1、ApoM抗體的表達。
　　結(jié)果:
　　與安慰劑組相比，富氫水組血漿pre-β1-HDL水平顯著升高（P<0.05）；血漿TC與LDL-C水平有下降趨勢，HDL水平?jīng)]有變化

8、；富氫水組HDL明顯促進ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）介導的膽固醇溢出（P<0.05）；富氫水干預使HDL的其他功能得到顯著改善：抑制LDL的氧化（P<0.05），抑制氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）誘導的單核細胞向內(nèi)皮細胞的粘附，抑制ox-LDL誘導的內(nèi)皮細胞的凋亡；Western blot分析表明血漿載脂蛋白ApoB-100顯著降低（P<0.05），ApoM顯著增加（P<0.01）；飲氫氣水后血漿和HDL中炎癥及氧化應激指標顯