2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討大鼠肝癌組織中肝癌缺失基因1(deleted in liver cancer-1,DLC1),凋亡相關斑點樣蛋白(apoptosisi-associated speck-like proteincontaining a CARD,ASC),p16又稱多腫瘤抑制基因(multiple tumorsuppressor1,MTS)和脂肪前體細胞因子-1(Delta-like1 homologue,DLK1)這4種基因啟動子區(qū)域的甲基

2、化狀態(tài)與黃曲霉毒素B1誘發(fā)的大鼠肝癌的關系。
  方法:1、實驗標本:將50只Wistar雄性大鼠按體重隨機分為黃曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)實驗組(35只)和空白對照組(15只)。按期在實驗組大鼠腹部用AFB1行腹腔注射,誘發(fā)大鼠肝癌,并制作建立大鼠實驗動物肝癌模型,空白對照組大鼠均未予以AFB1處理。2、標本采集:在實驗第52周全部處死,取肝,觀察其肝臟病理組織改變。3、標本檢測:運用甲基化特異性聚合酶鏈式

3、反應(Methylation-Specific Polymerase ChainReaction,MS-PCR)技術、瓊脂糖凝膠電泳和基因測序方法檢測大鼠肝癌組織中及正常肝臟組織中的4種基因DLC1,ASC,p16和DLK1啟動子區(qū)域的甲基化情況,分析這4種基因啟動子區(qū)域的甲基化狀態(tài)與AFB1誘發(fā)的大鼠肝癌的關系。
  結果:1、在實驗第52周可以看見實驗組大鼠肝臟表面凹凸不平,肝臟組織出現各種異常增生灶以及增生結節(jié),呈球形或子葉

4、狀,有的為單個結節(jié),有的彌散分布于整個肝臟,有的巨塊型癌結節(jié)周邊有散在的衛(wèi)星狀癌結節(jié),灰白色,質較硬,中間常有出血壞死,與四周組織界限不清;組織學表現為肝臟出現大小不一的細胞,為多角形,細胞核較正常肝細胞增大,出現雙核或多核現象,染色質深染,核質比增大,呈不典型增生現象,肝癌細胞出現。胞漿豐富,顆粒狀,嗜堿性,有膽汁分泌,排列成索狀或細光束形狀的細胞,細胞索之間有的血竇豐富。對照組大鼠肝臟表面光滑,顏色鮮艷,紅棕色,質地軟而脆,顯微鏡下

5、觀察肝臟組織未見異常。2、MS-PCR技術檢測顯示在大鼠肝癌組織中4種候選基因DLC1、ASC、p16和DLK1啟動子區(qū)域的甲基化率分別為83.3%(25/30)、93.3%(28/30)、86.7%(26/30)、10%(3/30),在大鼠正常肝臟組織中這4種基因的甲基化率分別為14.3%(2/14)、35.7%(5/14)、21.4%(3/14)、85.7%(12/14),用統(tǒng)計學方法計算P<0.05,兩者有統(tǒng)計學意義。3、在30例

6、大鼠肝癌組織中,有18例同時存在這4個基因異常甲基化,有28例同時存在3個及以上基因異常甲基化,30例均同時存在2個及以上基因異常甲基化,無1例僅出現一種基因異常甲基化。經統(tǒng)計學方法檢測,在大鼠肝癌中這4種基因的異常甲基化率具有一致性。
  結論:4種候選基因中的DLC1,ASC和p16這三種基因啟動子區(qū)域在AFB1誘發(fā)的大鼠肝癌組織中呈現高度甲基化,而另一種DLK1基因啟動子區(qū)域在AFB1誘發(fā)的大鼠肝癌組織中呈低甲基化水平,提示

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