沙利度胺治療GIVM的機制及療效和安全性研究.pdf

1、背景：
　　胃腸道血管畸形（GIVM）是引起不明原因消化道出血的主要原因，約占70%。到目前為止，GIVM的發(fā)病機制仍然是一個未解之謎。目前研究發(fā)現(xiàn)，低氧下表達增高的HIF1α和HIF2α與血管生成有關。然而，尚缺乏HIF1α和HIF2α在GIVM發(fā)病中作用機制的研究。研究證實沙利度胺治療GIVM具有良好的療效，其長期臨床療效及安全性尚需大樣本長期隨訪研究證實。
　　第一部分 HIF1α和HIF2α在GIVM發(fā)病中的作用及沙

2、利度胺對其表達的影響
　　目的：探討HIF1α和HIF2α在胃腸道血管畸形發(fā)病中的作用及沙利度胺對其表達的影響。
　　方法：免疫組化染色研究 GIVM患者手術切除標本及正常對照組織中HIF1α和HIF2α的表達情況。體外培養(yǎng)原代人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC），Western blot方法檢測常氧及低氧培養(yǎng)條件下HUVEC中HIF1α和HIF2α的表達情況。小鼠胸主動脈環(huán)血管形成實驗了解常氧及低氧培養(yǎng)下主動脈環(huán)血管形成情況。低

3、氧條件下培養(yǎng)HUVEC，同時予以200ug/ml沙利度胺刺激HUVEC不同時間；或予以不同濃度沙利度胺刺激HUVEC48小時，免疫熒光、Western blot方法檢測沙利度胺干預后HUVEC中HIF1α和HIF2α蛋白的表達。
　　結果：
　　1.免疫組化染色顯示GIVM手術標本中HIF1α和HIF2α表達明顯高于正常腸黏膜組織。
　　2.低氧培養(yǎng)下，HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白表達明顯高于常氧培養(yǎng)。

4、>　　3.低氧培養(yǎng)下，小鼠胸主動脈環(huán)血管形成明顯增多。4沙利度胺可以在體外抑制低氧培養(yǎng)下HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白的表達。
　　結論：HIF1α和HIF2α可能與GIVM發(fā)病機制有關，沙利度胺可以抑制低氧情況下HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白的表達。
　　第二部分 HIF1α和HIF2α對血管生成通路的影響
　　目的：探討HIF1α和HIF2α對血管生成通路的影響。
　　方法：過表達HUVEC

5、HIF1α和HIF2α基因后，實時定量PCR法和Western blot方法測定其HIF1α、HIF2α、VEGF、Notch1、Dll4及Ang2 mRNA和蛋白表達水平，雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灹私釮IF1α和HIF2α對VEGF基因啟動子區(qū)域活性的影響。Matrigel膠小管形成實驗了解HIF1α和HIF2α對HUVEC血管形成能力的影響。
　　結果：過表達HUVEC的HIF1α和HIF2α水平后，VEGF基因啟動子區(qū)域活性明

6、顯增強，VEGF、Notch1、 Dll4和Ang2的mRNA和蛋白表達水平明顯升高，血管生成明顯增加。
　　結論：過表達HIF1α和HIF2α可促進VEGF、Notch1、Dll4和Ang2 mRNA和蛋白的表達，促進血管形成。
　　第三部分沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的長期療效及安全性
　　目的：研究沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的長期療效及安全性。
　　方法：前瞻性地收集GIVM出血患

7、者80例，所有入組患者予以沙利度胺口服治療，并隨訪至少1年以上。主要療效指標指沙利度胺治療的總體有效率。次要療效指標指完全止血率，并評價患者治療前后年均輸血量、年均出血次數(shù)、血紅蛋白水平和年均住院次數(shù)的變化。評價GIVM患者口服沙利度胺后不良反應發(fā)生率。
　　結果：
　　1.完整隨訪期內(nèi)，沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的總體有效率為79.49%。
　　2.服用沙利度胺后，完全止血率為38.46%。GIVM出血