不同缺血后處理方案對兔擠壓綜合征損傷保護(hù)作用的實驗研究.pdf

1、背景：
　　近年來，我國地震災(zāi)害頻發(fā)，其中擠壓綜合征(Crush Syndrome， CS)是地震災(zāi)后傷亡原因中僅次于直接創(chuàng)傷致死的第二死因。缺血后處理(Ischemic Post-conditioning，IPost)作為缺血再灌注損傷后的一項新型治療手段，是否對擠壓綜合征所導(dǎo)致的損傷同樣具有保護(hù)作用？本課題將通過動物實驗來觀察不同時間缺血后處理方案對家兔擠壓綜合征損傷的保護(hù)效應(yīng)。
　　目的：
　　一、建立具有可重復(fù)

2、性的家兔CS模型。
　　二、篩選缺血后處理對家兔CS損傷保護(hù)效應(yīng)的最佳時間窗。
　　三、驗證無創(chuàng)缺血后處理對家兔CS損傷的保護(hù)效應(yīng)。
　　方法：
　　選取56只健康成年日本大耳白兔，體重2.3±0.2Kg，隨機(jī)分為七組(n=8)，使用自動氣壓止血帶對家兔單下肢進(jìn)行擠壓(100Kpa，8h)建立CS模型，如下：
　　S組（Sham組，）為假手術(shù)對照組，擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝處股動、靜脈，1小時后縫

3、合雙下肢切口。
　　后處理A組（IPA組，5×5s/5s），擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝處股動、靜脈，解壓后立即給予動脈夾夾閉動、靜脈5秒，再灌注5秒，循環(huán)5次，1小時后縫合雙下肢切口。
　　后處理B組（IPB組，5×30s/30s），擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝處股動、靜脈，解壓后立即給予動脈夾夾閉動、靜脈30秒，再灌注30秒，循環(huán)5次，1小時后縫合雙下肢切口。
　　后處理C組（IPC組，5×1min/1

4、min），擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝處股動、靜脈，解壓后立即給予動脈夾夾閉動、靜脈1分鐘，再灌注1分鐘，循環(huán)5次，1小時后縫合雙下肢切口。
　　后處理D組（IPD組，5×5min/5min），擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝處股動、靜脈，解壓后立即給予動脈夾夾閉動、靜脈5分鐘，再灌注5分鐘，循環(huán)5次，1小時后縫合雙下肢切口。
　　后處理E組（IPE組，5×10min/10min），擠壓造模8小時后，游離雙下肢腹股溝

5、處股動、靜脈，解壓后立即給予動脈夾夾閉動、靜脈10分鐘，再灌注10分鐘，循環(huán)3次，1小時后縫合雙下肢切口。
　　無創(chuàng)后處理F組（IPF組，5×1min/1min），擠壓造模8小時后，解壓后立即使用旋壓式止血帶捆綁雙下肢1分鐘，再灌注1分鐘，循環(huán)5次。
　　實驗中分別通過耳中動脈置管，連接多道生理信號采集系統(tǒng)，分別在擠壓前、解壓時及解壓后2h、6h、12h、18h、24h七個時間點進(jìn)行測量動脈壓、心率和尿量，取耳中動脈血用全自

6、動血液生化分析儀檢測K+、Scr、BUN、CK的變化，用ELISA法檢測血清中NGAL、Mb和IL-6的變化，取腎臟及擠壓處肌肉組織進(jìn)行病理觀察。同時觀察家兔在整個實驗中的生命體征變化及局部癥狀變化。
　　結(jié)果：
　　解除壓迫后各組均出現(xiàn)精神萎靡，呼吸急促，心率減慢，體溫下降。在解壓后24小時內(nèi)有17只家兔出現(xiàn)死亡（S組3只，IPA～I(xiàn)PD組各2只，IPE和IPF組各3只），均出現(xiàn)在解壓后18～24小時之間。在解壓2h后各組

7、均出現(xiàn)尿量減少，顏色加深，甚至出現(xiàn)肌紅蛋白尿，解壓18h后均為無尿情況，各組尿量之間無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　解壓后各組MAP逐步上升，解壓后2小時達(dá)到峰值，解壓2小時以后逐步下降。各缺血后處理實驗組的血液指標(biāo)均比對照S組低，其中在部分血液指標(biāo)(CK、Scr、K+、MB、BUN、IL-6及NGAL)中，IPC和IPD組(1～5min)的在解壓2h后降低的更為顯著，與其他各組相比均具有統(tǒng)計學(xué)意義，其中IPC組降低的最為顯著。
　　使

8、用旋壓止血帶給予雙下肢(5×1min/1min)再灌注的無創(chuàng)缺血后處理（IPF組），進(jìn)一步驗證其保護(hù)效應(yīng)，IPF組與IPC組在各項血液指標(biāo)的統(tǒng)計結(jié)果表示，二者均無差異顯著性，表明無創(chuàng)缺血后處理同樣可以具有保護(hù)作用。
　　結(jié)論：
　　一、利用自動氣壓止血帶給予家兔單下肢100Kpa擠壓8h可以穩(wěn)定建立擠壓綜合征的模型。
　　二、給予擠壓綜合征家兔雙下肢5個循環(huán)1～5min的遠(yuǎn)隔缺血后處理可以對機(jī)體損傷產(chǎn)生有效的保護(hù)作用并