他克莫司誘導(dǎo)移植術(shù)后糖尿病的機(jī)制研究——“脂肪因子的調(diào)變”.pdf

1、目的：
　　盡管免疫抑制劑的使用顯著性延長了移植物近期存活率（腎移植一年存活高達(dá)98％），但是并未明顯改善長期的存活率。移植術(shù)后糖尿病(PTDM)是實(shí)質(zhì)器官移植術(shù)后的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，嚴(yán)重影響了移植受著的術(shù)后生活質(zhì)量和生存率與器官存活率。FK506（他克莫司）是目前臨床運(yùn)用較為廣泛的免疫抑制劑，同時(shí)也是移植術(shù)后糖尿病的主要危險(xiǎn)因素之一。本研究主要探討鈣調(diào)磷酸酶抑制劑FK506對(duì)血糖的影響，并研究其可能的機(jī)制。
　　方法：

2、>　　健康SD大鼠18只，隨機(jī)分為3組:對(duì)照組（生理鹽水，1mL·kg-1·d-1）、模型組（FK506，1mg·kg-1·d-1）、治療組(FK506，1mg·kg-1·d-1，+ Rosi，4mg·kg-1·d-1)每天監(jiān)測體重，每兩天測空腹血糖，并于第15天測大鼠口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)。第16天禁食8小時(shí)后，取大鼠血清及脂肪組織、肝臟組織及肌肉組織，放射免疫檢測法檢測大鼠血清中空腹胰島素及脂肪因子(脂聯(lián)素(adiponec

3、tin)、瘦素(leptin)、內(nèi)酯素(visfatin)、抵抗素(resistin)、視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)）的量，熒光PCR檢測脂肪因子mRNA及氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPAR-γ)及GLUT4 mRNA的表達(dá)。Western Blotting檢測PPAR-γ、脂聯(lián)素及GLUT4蛋白的表達(dá)及Akt的磷酸化水平。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組和治療組相比，模型組在第10天后空腹血糖逐漸升高，顯著高于對(duì)照組(p＜0.

4、05，n=6);在第14天，模型組血糖由5.1±0.62 mmol·L-1升到7.73±0.73 mmol·L-。治療組與對(duì)照組血糖無顯著變化，分別由4.60±0.55 mmol·L-1升到6.30±0.36 mmol·L-1，由4.66±0.32 mmol·L-1升至5.8±0.10 mmol·L-1。OGTT顯示模型組大鼠OGTT2h血糖顯著高于對(duì)照組(p＜0.01，n=6)與治療組(p＜0.01，n=6)。與對(duì)照組相比，模型組大鼠

5、血清胰島素明顯下降(p＜0.05，n=6);治療組大鼠血清中胰島素沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05，n=6);模型組大鼠血清胰島素的含量最低(18.65±3.15μIU/mL)，對(duì)照組與模型組大鼠血清胰島素量分別為22.80±3.55μ IU/mL及20.76±3.42μ IU/mL。與對(duì)照組相比，模型組adiponectin、leptin的量下降，visfatin、resistin、RBP4的含量上升;經(jīng)羅格列酮干預(yù)后，治療組adipon

6、ectin、leptin、visfatin的量上升，resistin、RBP4的量下降，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性。模型組脂肪組織的adiponectin、leptin mRNA表達(dá)比對(duì)照組明顯降低(p＜0.05，n=3)，而visfatin、resistin、RBP4 mRNA的表達(dá)明顯升高(p＜0.01，n=3)。經(jīng)羅格列酮干預(yù)后，治療組adiponectin、leptin及RBP4mRNA升高(p＜0.05，n=3)，visfatin、r

7、esistin mRNA降低(p＜0.05，n=3)。模型組中脂肪組織、肝臟組織、肌肉組織中PPAR-γ mRNA及GLUT4 mRNA表達(dá)最低，經(jīng)干預(yù)后，PPAR-γ mRNA及肌肉組織中的GLUT4 mRNA與對(duì)照組無明顯差異性(p＞0.05，n=3)，但脂肪組織及肝臟組織中GLUT4 mRNA表達(dá)低于對(duì)照組(p＜0.05，n=4)。Western Blotting結(jié)果顯示，模型的脂肪組織、肝臟組織、肌肉組織中PPAR-γ的表達(dá)量明

8、顯低于對(duì)照組與治療組(p＜0.05，n=3)，經(jīng)干預(yù)后有所回升，但低于對(duì)照組(p＜0.05，n=3);模型組脂肪組織中脂聯(lián)素表達(dá)量明顯低于對(duì)照組與治療組(p＜0.05，n=3)，經(jīng)干預(yù)后有所回升，但低于對(duì)照組(p＜0.05，n=3);模型組大鼠脂肪組織、肌肉組織中GLUT4蛋白表達(dá)量低于治療組及對(duì)照組，肝臟組織中GLUT4蛋白表達(dá)量高于治療組及對(duì)照組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性(p＞0.05，n=3);模型的脂肪組織、肝臟組織、肌肉組織中AKT的