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文檔簡介
1、目的:
目前,器官移植已經(jīng)成為終末期器官功能衰竭患者的有效治療手段,但長期使用免疫抑制劑可引起許多不良反應(yīng),而且免疫抑制劑無助于移植慢性排斥反應(yīng)和移植物的長期存活。器官移植后最理想的措施是針對供體移植物建立特異性免疫耐受,因此,如何誘導(dǎo)供體特異性移植耐受成為解決器官移植排斥反應(yīng)的最佳手段,也成為臨床器官移植免疫學(xué)研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域及主要目標(biāo)之一。本研究通過大鼠腎臟移植受體輸注抗淋巴細(xì)胞血清后對移植腎的影響,進(jìn)行抗淋巴細(xì)胞血清聯(lián)
2、合免疫抑制劑誘導(dǎo)免疫耐受的研究。
方法一:
建立一種新的簡便的大鼠腎臟移植模型:采用支架導(dǎo)管連接固定代替血管吻合和輸尿管膀胱瓣皮膚造瘺的方法(修剪兩段長約0.8cm的3F導(dǎo)管作為支架,分別將其置入供受體腎動靜脈斷端后固定,行輸尿管膀胱瓣皮膚造瘺)。
結(jié)果一:
共施行大鼠腎移植30例,1例因麻醉過量呼吸抑制于術(shù)中死亡,2例因游離受體腎靜脈時損傷血管導(dǎo)致大出血死亡,3例因動脈吻合口血栓
3、形成導(dǎo)致手術(shù)失敗,2例因靜脈吻合口血栓形成導(dǎo)致手術(shù)失敗,剩余22例術(shù)后5~10d死亡(存活5d以上視為成功),手術(shù)成功率為73.3%。
方法二:
聯(lián)合應(yīng)用抗淋巴細(xì)胞血清(ALS)與他克莫斯(FK506)誘導(dǎo)免疫耐受:受體Wistar大鼠共32只分為4組,各組樣本量8只。A:正常對照組(僅行腎移植);B:ALS+腎移植;C:FK506+腎移植組;D:ALS+FK506+腎移植。(ALS組):移植手術(shù)前1天腹腔注
4、射ALS,劑量1ml/kg,以后每天1次,連續(xù)應(yīng)用至術(shù)后第10天;(FK506組):移植手術(shù)前1天開始應(yīng)用FK506,劑量0.5mg/kg,每天1次,連續(xù)應(yīng)用至術(shù)后第10天;(ALS+FK506組):聯(lián)合使用ALS與FK506,方法同前。觀察各組大鼠的存活時間,監(jiān)測血清肌酐濃度,并進(jìn)行移植腎彩色多普勒超聲。移植物病理學(xué)檢查,在光鏡下觀察各組移植物淋巴細(xì)胞浸潤和組織結(jié)構(gòu)的變化。采用遲發(fā)性超敏反應(yīng)(DTH)法檢測存活大鼠的免疫耐受狀態(tài)。
5、r> 結(jié)果二:
1.受者存活時間:D組平均存活時間為37d,與A組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。D組平均存活時間與B組及C組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
2.移植腎功能測定:A組術(shù)后3d切除自體腎臟后,血清肌酐濃度迅速上升;B組及C組血清肌酐濃度呈現(xiàn)緩慢上升趨勢,D組移植腎功能基本保持穩(wěn)定,術(shù)后30天出現(xiàn)緩慢上升。
3.移植腎病理學(xué)觀察結(jié)果:術(shù)后1周正常對照組移植腎
6、腎間質(zhì)水腫,并有淋巴細(xì)胞浸潤,腎小管上皮細(xì)胞變性壞死、脫落,血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,并可見微血栓形成。術(shù)后10天抗淋巴細(xì)胞血清(ALS)+腎移植組和FK506+腎移植組未見急性排斥反應(yīng),見少量淋巴細(xì)胞浸潤,血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹不明顯。同期ALS+FK506+腎移植組未見明顯淋巴細(xì)胞浸潤,無急性排斥反應(yīng)改變,腎小管上皮細(xì)胞未見變性壞死、脫落。ALS+FK506+腎移植組在移植后25天進(jìn)行移植腎病理檢查,發(fā)現(xiàn)腎間質(zhì)有少量淋巴細(xì)胞浸潤,腎小球基底膜稍增
7、厚,但無微血栓形成,無明顯急性排斥反應(yīng)表現(xiàn)。
4.移植腎彩色多普勒超聲檢測:術(shù)后1周檢查A組移植腎血供差,平均阻力指數(shù)0.80±0.06;B組和C組移植腎血供良好,平均阻力指數(shù)分別為0.80±0.06、0.63±0.08;D組移植腎血供良好,平均阻力指數(shù)0.61±0.04。A組與D組相比較,P<0.05,差別明顯。
術(shù)后20天檢查D組移植腎血供良好,平均阻力指數(shù)0.62±0.03;術(shù)后35天檢查D組移植腎血供
8、差,平均阻力指數(shù)0.78±0.07。D組術(shù)后1周與術(shù)后35天比較,P<0.05,差別明顯。
5.遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH):A組Wistar大鼠對SD大鼠脾細(xì)胞抗原的DTH非常明顯,5只實(shí)驗(yàn)小鼠的右后足掌發(fā)紅及腫脹明顯,以兩足掌厚度之差(mm)表示的DTH指數(shù)為0.44±0.05。第2、第3組和第4組8只Wistar大鼠DTH反應(yīng)引起的足掌腫脹明顯減輕,其DTH指數(shù)分別為0.24±0.05、0.25±0。06和0.22±0.
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