他克莫司對淋巴細胞的作用及對黑素細胞的影響.pdf

1、目的:
　　 觀察他克莫司對淋巴細胞增殖、分泌IL-6和sIL-2R及IL-6mRNA,sIL-2RmRNA表達的影響及其通過淋巴細胞對黑素細胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性及VIT-1mRNA表達的影響,探討其在治療白癜風中的作用機制。
　　 方法:
　　 本實驗選用人Jurkat淋巴瘤細胞株和小鼠B16黑素瘤細胞株為研究對象,采用ELISA法測定他克莫司對淋巴細胞分泌IL-6和sIL-2R的影響,MTT法檢測他

2、克莫司對淋巴細胞增殖及淋巴細胞上清液對黑素細胞增殖的影響,NAOH裂解法測定淋巴細胞上清液對黑素細胞黑素合成的影響,多巴氧化法測定淋巴細胞上清液對黑素細胞酪氨酸酶活性的影響,SYBR GREEN實時熒光定量PCR法分析他克莫司對淋巴細胞IL-6mRNA,sIL-2RmRNA表達的影響及淋巴細胞上清液對黑素細胞VIT-1mRNA表達的影響。
　　 結果:
　　 101～102nmol/L的他克莫司對淋巴細胞增殖無影響,10

3、3～104nmol/L的他克莫司對淋巴細胞增殖有抑制作用。
　　 ELISA結果顯示:102～104nmol/L的他克莫司均可以降低淋巴細胞合成IL-6和sIL-2R(P<0.05),其中103 nmol/L和104nmol/L的他克莫司作用顯著(與對照組比較,P<0.01)。
　　 經他克莫司作用后的淋巴細胞上清液對黑素細胞增殖的影響不明顯。
　　 經101～104nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細胞上清液均

4、可促進黑素細胞黑素合成的增加,其中經高濃度(103 nmol/L,104nmol/L)的他克莫司作用后的淋巴細胞上清液對黑素細胞黑素合成的促進作用強于低濃度(101 nmol/L,102nmol/L)。
　　 經101～104nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細胞上清液均可以提高黑素細胞的酪氨酸酶活性,其中經高濃度(103 nmol/L,104nmol/L)的他克莫司作用后的淋巴細胞上清液對黑素細胞酪氨酸酶活性的促進作用強于低濃

5、度(101 nmol/L,102 nmol/L)。
　　 實時熒光定量RT-PCR結果顯示:經102nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細胞,IL-6 mRNA、sIL-2R mRNA相對表達量均減少,與對照組相比具有統(tǒng)計學意義(P均<0.05),黑素細胞經他克莫司刺激后的淋巴細胞上清液作用后,VIT-1mRNA相對表達量增加,與對照組相比具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論:
　　 他克莫司對淋巴細胞的直