牛初乳對小鼠淋巴細胞的影響.pdf

1、目的：近幾年，人們對于牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用進行了大量的研究，但多數(shù)研究方法簡單，可信度不強。利用現(xiàn)代免疫學(xué)實驗技術(shù)及設(shè)備對牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用進行深入、細致、客觀的研究，驗證牛初乳的免疫調(diào)節(jié)功效性，這必將對牛初乳保健食品的開發(fā)，以至于整個乳業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。本實驗正是將流式細胞術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細胞熒光化學(xué)技術(shù)相結(jié)合，并利用抗原抗體結(jié)合原理，采用流式細胞儀檢測了小鼠外周血的T淋巴細胞亞群和B淋巴細胞；同時采用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢

2、測了牛初乳對小鼠胸腺細胞凋亡的影響。從而在免疫細胞數(shù)量和免疫器官細胞凋亡兩個方面評價了牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用。 方法：本實驗取雄性昆明小鼠40只，隨機分為4組，每組10只。按牛初乳粉人體推薦攝入量2g/日/60Kg等效劑量的1、10、20倍設(shè)低劑量組、中劑量組、高劑量組和一個對照組。低、中、高3個劑量組灌服牛初乳，對照組灌服等量的生理鹽水，連續(xù)灌胃30天。在末次灌胃24小時后，每組隨機取8只小鼠，眼球取外周血，樣品經(jīng)處理后上機進行

3、檢測。主要檢測指標(biāo)包括輔助性T淋巴細胞(Th)、抑制性T淋巴細胞(Ts)、B淋巴細胞，同時檢測了小鼠30天的增重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)。另取40只雄性昆明小鼠，隨即分為5組，每組8只。同樣按牛初乳粉人體推薦攝入量2g/日/60Kg等效劑量的1、10、20倍設(shè)低劑量組、中劑量組、高劑量組及陰性對照組和陽性對照組。低、中、高3個劑量組灌服牛初乳，對照組灌服等量的生理鹽水，連續(xù)灌胃15天。在末次灌胃12h后，每組隨機取5只小鼠，除陰性對照組外，其

4、余各組小鼠腹腔注射地塞米松25mg/kg，16小時后處死小鼠，取胸腺，瓊脂糖凝膠電泳檢測細胞凋亡。 結(jié)果：(1)Th細胞數(shù)量各組間差異不顯著(P＞0.05)；各組間Ts細胞的數(shù)量差異亦不顯著(P＞0.05)；中劑量組的總T細胞數(shù)量與其它各組比較明顯增多，與對照組比較差異顯著(P＜0.05)(2)中劑量組B細胞數(shù)量明顯降低，與其它各組比較差異顯著(P＜0.05)。(3)低劑量組的體重增加高于其它各組，但增加幅度不大，各組間差異不顯

5、著(P＞0.05)；(4)胸腺指數(shù)各組間差異不顯著(P＞0.05)；中劑量組小鼠的脾臟指數(shù)明顯降低，與其它各組間差異顯著(P＜0.05)。(5)注射地塞米松后小鼠胸腺細胞DNA出現(xiàn)梯形條帶，灌服牛初乳的各劑量組與陽性對照組比較沒有顯著區(qū)別，而陰性對照組DNA聚集在加樣孔附近，沒有出現(xiàn)梯形條帶。 結(jié)論：(1)中劑量組的總T細胞百分比數(shù)量顯著增加，與對照組比較差異顯著，說明中劑量組小鼠的細胞免疫有所增強。(2)中劑量組小鼠的B細胞百

6、分比數(shù)量明顯降低，但是T細胞、B細胞、和NK細胞百分比總和應(yīng)等于100％的淋巴細胞，由于人和鼠的NK細胞很少，因此中劑量組的T細胞百分數(shù)增多，B細胞百分數(shù)必然降低。同時由于免疫的復(fù)雜性以及B細胞發(fā)揮體液免疫的功能在于其分泌的抗體，因此，B細胞百分比的下降并不能說明其體液免疫有所下降。(3)沒有發(fā)現(xiàn)小鼠灌食牛初乳后對體重的增加有影響。(4)灌服牛初乳對小鼠的胸腺指數(shù)沒有影響，但是中劑量組的脾指數(shù)明顯下降，與其它各組差異顯著，這是否與中劑量