人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)類(lèi)噬血細(xì)胞綜合征小鼠模型肝臟損傷治療作用及機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分改良建立類(lèi)噬血細(xì)胞綜合征小鼠模型
　　目的：改良建立類(lèi)噬血細(xì)胞綜合征（hemophagocytic syndrome,HPS）小鼠模型，為其后續(xù)治療研究提供良好的載體。
　　方法：成年野生型 C57BL/6雄性小鼠按完全隨機(jī)方法分為實(shí)驗(yàn)組（CPG組）及對(duì)照組（PBS組），CPG組以隔日腹腔注射CPG-ODN1826一次及每日皮下注射IFN-?兩次的方法建立，PBS組則給予對(duì)應(yīng)量PBS緩沖液，干預(yù)周期為10天，干預(yù)期間

2、觀察小鼠一般活動(dòng)，干預(yù)結(jié)束后收集血液標(biāo)本及組織標(biāo)本進(jìn)行HPS相應(yīng)指標(biāo)檢測(cè)。
　　結(jié)果：與PBS組相比，CPG組小鼠出現(xiàn)精神萎靡、活動(dòng)減少、體重減少等；肝重體重比、脾重體重比顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；外周血三系下降，其中WBC的降低主要是有淋巴細(xì)胞的降低引起，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；血生化：ALT、AST、TG、LDH均顯著升高，ALB、FbG顯著下降,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；血清鐵蛋

3、白顯著升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；血清中IL-6、IL-10、IFN-γ水平顯著升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；肝臟、脾臟、股骨病理變化：肝細(xì)胞胞漿疏松，肝竇擴(kuò)張充血，可見(jiàn)血管及肝竇周?chē)装Y細(xì)胞聚集灶，偶見(jiàn)血管內(nèi)血栓形成；脾臟結(jié)構(gòu)混亂，紅髓、白髓分界不清，可見(jiàn)大量有核細(xì)胞浸潤(rùn)；股骨切片見(jiàn)骨髓嚴(yán)重發(fā)育不良，造血面積減少；同時(shí)在肝臟、脾臟及骨髓中均可見(jiàn)吞噬血細(xì)胞現(xiàn)象。
　　結(jié)論：CPG-ODN1826聯(lián)合I

4、FN-γ可使C57BL/6小鼠出現(xiàn)類(lèi)HPS癥狀，且增加IFN-γ可增加模型穩(wěn)定性，為后續(xù)治療研究提供良好載體。
　　第二部分人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)類(lèi)噬血細(xì)胞綜合征小鼠模型肝臟損傷修復(fù)作用及機(jī)制初探
　　目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）對(duì)類(lèi)噬血細(xì)胞綜合征（hemophagocytic lymphohistocytosis，HL

5、H）小鼠模型肝臟損傷的修復(fù)作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法：hUC-MSCs的體外標(biāo)記；將成年野生型C57BL/6小鼠54只按完全隨機(jī)方法分為模型損傷組（PBS組）、干細(xì)胞治療組（MSC組）、正常對(duì)照組（CON組），模型采用CPG-ODN1826聯(lián)合IFN-γ誘導(dǎo)產(chǎn)生，MSC組治療采用hUC-MSCs經(jīng)尾靜脈移植。觀察移植后第1、3、7天小鼠一般情況、血生化(ALT、AST、TG)，外周血（WBC、PLT、RBC、HGB）,第7天肝質(zhì)量

6、體質(zhì)量比，HE染色觀察肝臟組織病理改變，免疫組化法觀察第7天肝臟中活化巨噬細(xì)胞的數(shù)量,熒光顯微鏡下觀察MSC組CM-Dil標(biāo)記的hUC-MSCs的肝內(nèi)定植，免疫熒光法觀察第7天MSC組肝臟中抗人白蛋白抗體陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量。
　　結(jié)果：與PBS組相比，MSC組小鼠的狀態(tài)好轉(zhuǎn)，肝質(zhì)量體質(zhì)量比顯著下降（P<0.05）；ALT、AST、LDH、ALB、TG顯著降低（P<0.05），ALB無(wú)顯著升高（P>0.05），肝臟炎癥浸潤(rùn)減少、肝組織損