2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:采用TNBS構(gòu)建炎癥性腸病小鼠動(dòng)物模型,探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUC-MSCs)對(duì)TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病小鼠模型的治療作用及可能的機(jī)理,以及細(xì)胞輸注途徑、細(xì)胞數(shù)量等移植相關(guān)問(wèn)題對(duì)療效的影響,以期獲得臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療炎癥性腸病的臨床前研究數(shù)據(jù)。
  方法:一、炎癥性腸病小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建:采用單次灌腸及皮膚致敏聯(lián)合灌腸兩種方法,55只SPF雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分為7組,包括對(duì)照組、不同劑量TNBS單次灌腸組(1

2、00、150、175、200、225mg/kg)及皮膚致敏聯(lián)合灌腸組。各組于造模后5天取材,觀察結(jié)腸大體形態(tài)并評(píng)分;取病變處進(jìn)行石蠟包埋切片,HE染色,并進(jìn)行病理組織學(xué)評(píng)分。根據(jù)動(dòng)物體重變化、死亡率、大體評(píng)分及病理組織學(xué)評(píng)分結(jié)果,篩選最佳的模型制備方法。二、hUC-MSCs對(duì)炎癥性腸病小鼠模型的治療作用研究。采用皮膚致敏聯(lián)合灌腸制備炎癥性腸病小鼠模型,觀察hUC-MSCs輸注對(duì)腸道損傷的治療作用,根據(jù)動(dòng)物的生存率,體重變化,大體評(píng)分和病

3、理評(píng)分進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。并檢測(cè)血清中炎癥因子IL-10,IL-6,TNF-α,IFN-γ的含量,以及應(yīng)用CFSE標(biāo)記和人抗核抗體免疫熒光檢測(cè)hUC-MSCs在腸道的植入和存活,初步探討hUC-MSCs治療炎癥性腸病小鼠模型的可能機(jī)理。三、hUC-MSCs治療炎癥性腸病小鼠模型移植相關(guān)問(wèn)題探討。1、不同移植途徑比較:hUC-MSCs分別經(jīng)尾靜脈和腹腔兩種不同途徑移植入體內(nèi),觀察療效的差異,觀察指標(biāo)包括生存率,體重變化,大體評(píng)分和病理評(píng)分。2.

4、不同移植細(xì)胞數(shù)量比較:灌腸后小鼠隨機(jī)分為5組,包括對(duì)照組、不同劑量hUC-MSCs組(2×104、6×104、2×105、6×105/只),各組于移植后觀察生存率和體重的變化。
  結(jié)果:一、單次灌腸和皮膚致敏聯(lián)合灌腸制備炎癥性腸病小鼠模型:100、150mg/kgTNBS單次灌腸組動(dòng)物未見(jiàn)到明顯的潰瘍形成;其余劑量組動(dòng)物均有不同程度的潰瘍形成,造模成功率與劑量成正比,其中225mg/kg誘導(dǎo)組動(dòng)物成模率為100%,但病變較重、病

5、變不均一且偶有小鼠眼睛失明的副作用出現(xiàn)。皮膚致敏聯(lián)合灌腸組動(dòng)物均有潰瘍形成,造模成功率100%,病變適中且未發(fā)現(xiàn)小鼠眼睛失明的副作用。表明皮膚致敏聯(lián)合灌腸是制備TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病小鼠模型的最佳方法。二、hUC-MSCs對(duì)炎癥性腸病小鼠模型具有明顯的治療效果。hUC-MSCs經(jīng)尾靜脈移植后可以歸巢到腸道,降低受損結(jié)腸組織大體和病理評(píng)分,并且可以改善小鼠生存率。hUC-MSCs移植可下調(diào)血清中炎癥因子IL-6,IFN-γ,TNF-α含

6、量,上調(diào)抑炎因子IL-10的含量。三、不同途徑、不同細(xì)胞數(shù)量移植hUC-MSCs對(duì)炎癥性腸病小鼠模型的治療作用有差異。尾靜脈和腹腔輸注hUC-MSCs均可以降低受損結(jié)腸組織大體和病理評(píng)分,但在改善生存率方面腹腔移植途徑要優(yōu)于尾靜脈移植途徑;而尾靜脈移植的潰瘍修復(fù)效果優(yōu)于腹腔移植。hUC-MSCs細(xì)胞數(shù)量過(guò)高或過(guò)低均不能有效改善小鼠生存率變化和體重變化,只有在合適的范圍內(nèi)才能發(fā)揮治療效果。
  結(jié)論:175mg/kg~225mg/k

7、gTNBS單次灌腸及皮膚致敏聯(lián)合TNBS灌腸均可制備小鼠炎癥性腸病模型;皮膚致敏聯(lián)合TNBS灌腸制備的炎癥性腸病模型造模成功率高,病變適中,模型穩(wěn)定;hUC-MSCs對(duì)TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病小鼠模型有治療作用,移植后可以歸巢到腸道;腹腔注射和尾靜脈移植hUC-MSC對(duì)IBD小鼠模型均有治療作用,尾靜脈移植的潰瘍修復(fù)效果優(yōu)于腹腔移植;腹腔輸注hUC-MSCs在改善生存率方面優(yōu)于尾靜脈移植;細(xì)胞數(shù)量對(duì)hUC-MSC治療的療效有影響,過(guò)高或

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