過(guò)表達(dá)GRK6減輕骨癌痛大鼠痛覺(jué)高敏的研究.pdf

1、目的：
　　1.初步闡明骨癌痛的行為學(xué)特點(diǎn)及組織學(xué)的改變;
　　2.探討GRK6參與骨癌痛的調(diào)控作用。
　　方法：
　　1.骨癌痛模型的建立與驗(yàn)證:脛骨內(nèi)注射大鼠（180-220gSD雌性）Walker256乳腺癌細(xì)胞，建立骨癌痛大鼠模型(BCP)。分別在建模前后運(yùn)用VFF(Von Freyfilaments)、熱痛儀及雙足平衡實(shí)驗(yàn)（Weight Bearing Difference）行為學(xué)方法來(lái)測(cè)定大鼠的疼痛反

2、應(yīng)。
　　2.脛骨特異性DRG神經(jīng)元水平的研究:應(yīng)用Western Blotting和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)骨癌模型脛骨特異性DRG中GRK6分子表達(dá)水平的改變;免疫組織化學(xué)用來(lái)檢測(cè)GRK6在脛骨特異性DRG中的分布、共標(biāo)情況。
　　3、GRK6對(duì)骨癌痛的作用:鞘內(nèi)注射慢病毒LV-GRK6以增加DRG水平GRK6的表達(dá);運(yùn)用Western Blotting方法驗(yàn)證GRK6過(guò)表達(dá)的效果;行為學(xué)檢測(cè)過(guò)表達(dá)GRK6后對(duì)骨癌痛的影響。

3、
　　結(jié)果：
　　1.脛骨內(nèi)接種大鼠Walker256乳腺癌細(xì)胞建立骨癌痛大鼠模型，顯著降低骨癌大鼠的機(jī)械性痛、熱痛閾值，增大雙足平衡實(shí)驗(yàn)的雙足承重差異;
　　2.骨癌大鼠脛骨特異性DRG神經(jīng)元中GRK6在miRNA及蛋白水平表達(dá)顯著降低，免疫組化顯示GRK6主要分布在DRG中的神經(jīng)元中;
　　3.鞘內(nèi)注射慢病毒LV-GRK6上調(diào)骨癌大鼠脛骨特異性DRG中GRK6的表達(dá)。緩解了骨癌痛大鼠的痛覺(jué)高敏。
　　結(jié)