莖菜類植物中黃酮成分的提取解析.pdf

1、本文以芹菜和花椰菜為研究對(duì)象，利用加速溶劑萃取法(ASE)及大孔吸附樹(shù)脂對(duì)其所含黃酮進(jìn)行提取和純化，建立了HPLC-ESI-MSn分離鑒定黃酮的方法，并對(duì)芹菜和花椰菜中的黃酮進(jìn)行了鑒定。
　　通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)，確定了芹菜黃酮的最佳提取工藝條件:預(yù)熱時(shí)間:5 min，靜態(tài)萃取時(shí)間:5 min，萃取壓力:10.3 MPa，萃取溫度:90℃，萃取劑:80％乙醇水溶液，沖洗體積:60％，N2吹掃時(shí)間:60s，循環(huán)3次。
　　研究

2、了大孔樹(shù)脂純化芹菜黃酮的工藝條件，通過(guò)比較AB-8型、D101型、D4020型和NKA-9型4種樹(shù)脂對(duì)芹菜黃酮的吸附、解吸附性能，最終選擇D101型大孔樹(shù)脂純化芹菜黃酮，工藝條件為:黃酮上樣量與所用干樹(shù)脂的比例約為1.4 mg/g，洗脫劑:80％乙醇水溶液，收集4倍柱體積(BV)的洗脫溶液。
　　實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了液相色譜部分和質(zhì)譜部分的各項(xiàng)儀器參數(shù)，建立了黃酮的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分離鑒定方法。色譜柱型號(hào)為ZORBAX Eclipse XD

3、B-C18(2.1 mm×150 mm，3.5μm Agilent);柱溫為40℃;流速為0.2 mL/min;流動(dòng)相為甲醇(B)和含0.1％甲酸的水(A);梯度洗脫條件如下:0-20 min20％-30％ B;20-30 min30％-40％ B;30-55 min40％-55％ B;55-65 min55％ B;65-66 min55％-20％B;66-76 min20％B，二極管陣列檢測(cè)器(PDA)全掃描波長(zhǎng)為230-500 nm

4、。離子源為ESI源;金屬毛細(xì)管溫度為300℃;金屬毛細(xì)管電壓為-15V;電噴霧電壓為4.5 kV;鞘氣流速為30 arb;輔助氣流速為5arb。
　　芹菜葉、芹菜莖和花椰菜葉黃酮的提取量分別為14.53 mg/g，1.80 mg/g，6.35 mg/g。經(jīng)過(guò)D101大孔樹(shù)脂純化的黃酮粉末的純度為66.42％，而未經(jīng)大孔樹(shù)脂純化的黃酮粉末的純度為25.03％。加標(biāo)回收率在95％-108％的范圍內(nèi)。根據(jù)黃酮標(biāo)準(zhǔn)品在高效液相色譜中的保留