菜芙蓉中黃酮的提取及檢測(cè)方法的研究.pdf

1、菜芙蓉的花、莖、葉、種子中,都含有豐富的生物活性物質(zhì),本文主要對(duì)菜芙蓉種子、花以及莖中黃酮提取方法進(jìn)行了研究并開(kāi)發(fā)出了兩種熒光分析方法和一種高效液相色譜分析方法,從而對(duì)菜芙蓉中黃酮的單體蘆丁和槲皮素的含量進(jìn)行了檢測(cè)。
　　 本文主要以菜芙蓉的種子、花、莖為原料,采用傳統(tǒng)的乙醇浸提法,提取菜芙蓉中的總黃酮；并以蘆丁為對(duì)照品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,運(yùn)用硝酸鋁比色法測(cè)定總黃酮的含量。通過(guò)單因素試驗(yàn)方法,確定乙醇濃度、浸提時(shí)間、浸提溫度、液料比四

2、種因素的提取條件；根據(jù)二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)原理,在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用四因素五水平的響應(yīng)曲面分析方法進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)；同時(shí)通過(guò)響應(yīng)曲面的回歸分析方法,將因子(乙醇濃度、浸提時(shí)間、浸提溫度、液料比)與響應(yīng)值(提取率)的相互關(guān)系用多項(xiàng)式擬合,把因子和響應(yīng)值的關(guān)系函數(shù)化,通過(guò)對(duì)函數(shù)的面進(jìn)行分析,研究因子與響應(yīng)值之間、因子與因子之間的相互關(guān)系,并進(jìn)行優(yōu)化,從而獲得最優(yōu)的工藝參數(shù),提高了菜芙蓉樣品中黃酮的提取率。最終利用模型的響應(yīng)曲面圖及其等高

3、線圖,得到的優(yōu)化工藝參數(shù)為:乙醇濃度為53.9％、浸提時(shí)間為2.2h、浸提溫度為76.9℃、液料比為22.3mL·g-1時(shí)提取效果最佳,黃酮提取率高達(dá)3.6％。
　　 鑒于植物體內(nèi)含有豐富的蘆丁和槲皮素物質(zhì),尤其這兩種化合物在生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛運(yùn)用,本文根據(jù)蘆丁和槲皮素中特有的烯醇式的羥基或羧基結(jié)構(gòu)能與金屬離子形成π建共扼體系,形成具有靈敏度高、檢測(cè)限低的具有很強(qiáng)的熒光性化合物的性質(zhì),分別研究了蘆丁-鐵氰化鉀-硼砂體系和槲皮素

4、-Al3+體系熒光光度法進(jìn)行測(cè)定菜芙蓉中的蘆丁或槲皮素的含量,分析各體系的熒光性質(zhì)及影響因素,通過(guò)各體系的精密度和回收率試驗(yàn),開(kāi)發(fā)了關(guān)于菜芙蓉中的蘆丁和槲皮素的熒光檢測(cè)技術(shù)。
　　 為了進(jìn)一步更準(zhǔn)確地進(jìn)行定性定量分析菜芙蓉中黃酮類物質(zhì),本文最后研究并開(kāi)發(fā)了以蘆丁和槲皮素為標(biāo)準(zhǔn)物,采用C18反相色譜柱,二極管陣列檢測(cè)器高效液相色譜法分離分析菜芙蓉中的蘆丁和槲皮素的色譜分析方法,檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明菜芙蓉中確實(shí)含有豐富的黃酮類物質(zhì),該