橙色紅曲菌聚酮合酶基因的克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、南昌大學碩士學位論文橙色紅曲菌聚酮合酶基因的克隆姓名：魏康霞申請學位級別：碩士專業(yè)：微生物學指導教師：許楊20071221AbstractAbstractFungal叫ykctidesmalargefamilyofsecondarymembolkesexhibitavastdiversityofstructureandfunctionincludinglovastatiapigmentsandmycotoxinsThebiosynthe

2、sisoffIlⅡgalpalyketidesisgovernedbykeyenzymesInthispaperweclonedPKSgenesfxomMonascusaurantiacusAS34384，tomakethefoundationofthecharacterationoffunctionandthecloningoffulllengthPKSgenesThemainresearchrestatsareasfollows：1

3、Twopairsofdegenerateprimers(pksFl／R1andpksFVR2)weredesignedbasedonsequencesfromknownfIlⅡgalPKSgenesFourPKSfragmentswc北mplificdfromMonascusaurantiacusAS34384usingpksFl／R1andpksFl／R2，andnamedpksl，pks2，pks3andpksl0，respecti

4、velyTheBlastsearches(NCBDrevealedpks2wasapartofpksl(7144bp，accessionnosAJ414729inGenBank)inMonascuspurpureus，reportedonlyinadatabase2Threespecificprimers(PFl／PRIPF3／PR3andPFIO／PRl0)weredesignedbasedonsequencesofpksl，pb3a

5、ndpkslO，respectivelyThreepositivefosmidcloneswerescrceneztfromafosmidlibraryofMonascusauranaacusAS34384usingeachofthethre圯speci丘cprimerpairsAfterdistruptionofpositivefos血dSbyultrasonieationthesonicatedDNAweresubcloncdint

6、opUCl8toconstructthree24KBlibrariesThreePKSgeneswereobtainedfromthecorrespondingsubelonelibraryanddesignatedMApkalMApks3andMa#slOrespectively一3Bybioinformaticsanalysis，thededucedaminoacidsequenceofMApkslwaspossiblelythec

7、itfininbiosyntheticPKSandclassifiedasnonreducingⅢPKSwhereasthetranslatedsequencesfromMApks3andMApkslObadhomologouswithPKSinvolvedinTtoxinandlovastatinbiosynthesisandclassifiedasreducingPKSKeyword：polyketideMonascusaurant

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