橙色紅曲菌ACS基因和GMC基因缺失菌株的構建及其功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅曲菌是我國重要的微生物資源，能夠產生多種具有生物活性的代謝產物，具有很高的商業(yè)價值。但是由于紅曲菌產桔霉素問題的存在，對紅曲的安全性提出了懷疑。 本文采用分子生物學技術，初步研究了?；o酶A合成酶(簡稱ACS)和GMC氧化還原酶(簡稱GMC)編碼基因的生物學功能，為闡明桔霉素代謝途徑提供理論依據。主要研究內容如下： 1.Blast比對分析，預測ACS基因為?；o酶A合成酶的編碼基因，GMC基因為芳香醇脫氫酶的編碼基因，

2、推測ACS和GMC基因可能參與桔霉素生物合成途徑。 2.通過酶切、連接和轉化等DNA重組技術，成功構建了置換型打靶載體pACS-HPH和pGMC-HPH，載體中含有潮霉素抗性標記。 3.采用原生質體PEG介導轉化將置換型打靶載體pACS-HPH和pGMC-HPH分別轉入橙色紅曲菌AS3.4384中，采用潮霉素抗性篩選和基因組DNA的PCR篩選，分別獲得ACS-6和GMC-8紅曲菌缺失菌株。 4.采用HPLC分別檢

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