C-藻藍(lán)蛋白及其亞基的分離純化和體外抗腫瘤研究.pdf

1、藻藍(lán)蛋白(phycocyaninPC)是藻膽蛋白的重要組分，主要存在于藍(lán)藻、紅藻、隱藻和少數(shù)一些甲藻中，是這些藻類進(jìn)行光合作用的捕光色素之一。根據(jù)來源不同，一般分為C-藻藍(lán)蛋白(C-PC)和R-藻藍(lán)蛋白(R-PC)兩種。藻藍(lán)蛋白由α和β亞基組成，在天然條件下，大多數(shù)以(αβ)3或(αβ)6等雜聚體形式存在。本文從鈍頂螺旋藻中大量提取C-PC，研究了C-PC在體外對(duì)肺腺癌SPC-A1細(xì)胞的殺傷作用，初步探討了C-PC的體外抗腫瘤作用機(jī)制；

2、首次從C-PC中分離純化到了具有完整熒光活性的α和β亞基，并對(duì)分子量更小，更適于成為藥物的兩個(gè)亞基進(jìn)行了體外抗腫瘤試驗(yàn)。為C-PC及其α、β亞基能否成為新一代抗腫瘤藥物建定了一定的理論基礎(chǔ)。　　本實(shí)驗(yàn)以新鮮鈍頂螺旋藻為實(shí)驗(yàn)材料，建立起一套高效，簡(jiǎn)便的藻藍(lán)蛋白分離純化工藝，得到了最高純度在4.5以上的藻藍(lán)蛋白純品，通過反復(fù)摸索和試驗(yàn)，運(yùn)用CM-sepharose離子交換層析法從制備的新鮮藻藍(lán)蛋白純品中分離得到α和β亞基，并成功對(duì)兩個(gè)亞基

3、進(jìn)行復(fù)性。經(jīng)SDS-PAGE電泳、紫外/可見分光光度計(jì)及熒光分光光度計(jì)檢測(cè)鑒定，分離得到的α和β亞基具有特異的光譜學(xué)性質(zhì)和熒光活性，跟有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致?！　-PC、α和β亞基的體外細(xì)胞毒性分析顯示，三者對(duì)SPC-A1細(xì)胞的生長(zhǎng)均有一定的抑制作用。在相同摩爾濃度下，β亞基具有對(duì)SPC-A1細(xì)胞最強(qiáng)的殺傷功效，并有良好的時(shí)間和劑量關(guān)系，提示其具有成為抗腫瘤藥物的良好潛力?！　⊙芯窟€顯示，較高濃度(≥40μM)的C-PC也可在體外顯著抑