從“絡(luò)脈虛滯”論治心腦血管疾病驗(yàn)案探析及丹參多酚酸干預(yù)腦缺血再灌注損傷早期炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　1.探討張軍平教授運(yùn)用“絡(luò)脈虛滯”理論論治心腦血管疾病的學(xué)術(shù)思想及經(jīng)驗(yàn)。
　　2.研究大鼠腦缺血再灌注損傷后NLRP3及其下游炎癥分子在腦組織中的表達(dá)情況，并觀察中成藥物丹參多酚酸對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，研究其是否通過調(diào)控NLRP3炎癥小體及其下游相關(guān)炎癥因子表達(dá)發(fā)揮腦保護(hù)作用。
　　方法：
　　1.通過臨床跟診學(xué)習(xí)，總結(jié)、分析張軍平教授治療心腦血管疾病臨床驗(yàn)案，深入分析典型病例，探析“絡(luò)脈

2、虛滯”理論指導(dǎo)下的心腦血管疾病臨床診療思路。
　　2.雄性S D大鼠，采用短暫性大腦中動(dòng)脈栓塞模型（tMCAO)，缺血90min后拔栓實(shí)現(xiàn)再灌注，模擬急性再灌注損傷患者。將造模后的大鼠隨機(jī)分為模型組（tMCAO組)與丹參多酚酸治療組（S L I組）假手術(shù)組（sham組）手術(shù)只分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，不插入栓子。治療組再灌注后1h采用尾源靜脈注射丹參多酚酸溶液（9mg/kg)，假手術(shù)組和模型組分別注射等體積生理鹽水。各組大鼠取材前進(jìn)行神經(jīng)

3、功能評(píng)分。各組分別于再灌注后6h，12h，24 h取材。通過神經(jīng)功能評(píng)分情況判斷各組神經(jīng)功能缺損情況；尼氏染色，觀察腦缺血再灌注后神經(jīng)元生存情況；MPO免疫組化染色觀察缺血再灌注后炎性浸潤情況；應(yīng)用Real-time PCR檢測腦組織中NLRP3等基因表達(dá)情況；酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測腦組織IL-1P、IL-18等促炎因子表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.心腦血管患者由于氣血不足導(dǎo)致絡(luò)脈失養(yǎng)，又脾腎虧虛，痰濁停滯，濁瘀互結(jié)

4、，最終導(dǎo)致“絡(luò)脈虛滯”的一種狀態(tài)。張軍平教授在應(yīng)用“絡(luò)脈虛滯”理論治療心腦血管疾病中多應(yīng)用柴胡桂枝湯、柴苓湯、升降散、四妙勇安湯等方劑加減治療，并取得一定療效。
　　2.與假手術(shù)組相比，模型組存在明顯神經(jīng)功能損傷，神經(jīng)功能評(píng)分明顯增高，應(yīng)用丹參多酚酸注射液治療后24h，神經(jīng)功能有所改善。與假手術(shù)組相比，模型組和丹參多酚酸組神經(jīng)元損傷明顯，某些神經(jīng)元的細(xì)胞核邊界不清，部分神經(jīng)元核仁消失；空泡樣改變出現(xiàn)；尼氏體減少，神經(jīng)元數(shù)量明顯減少

5、；與模型組相比，丹參多酚酸組神經(jīng)元損傷情況有所改善。與假手術(shù)組相比，模型組與丹參多酚酸組MPO表達(dá)明顯，與模型組相比，丹參多酚酸組MPO表達(dá)有所減少。與假手術(shù)組相比，腦皮質(zhì)損傷區(qū)NLPR3 mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高。腦組織中IL-1P和IL-18等炎癥因子的表達(dá)也明顯增高，并且IL-1P的表達(dá)在造模后12h達(dá)到最高，隨后逐漸下降；在造模后6h、12h、24h，IL-18的表達(dá)逐漸升高。與模型組相比，丹參多酚酸組無論N L R P