利用混合雜質對照物質評價β-內酰胺類抗生素色譜系統(tǒng)的策略.pdf

1、對藥品進行質量控制是保證藥品安全有效的基礎和前提，而藥品雜質控制是藥物質量控制研究的重要內容。隨著“雜質譜控制”理念逐漸成熟，選擇一個能夠有效分離所有雜質的分離分析方法已成為雜質分析的前提。目前，利用反相液相色譜系統(tǒng)分析有關物質仍是藥品雜質譜控制的主要手段。
　　當一個已建立的有關物質HPLC分析方法在不同實驗室間轉移（Transfer）時，如何確保色譜系統(tǒng)的有效性和重現(xiàn)性至關重要。本文提出在HPLC分析方法轉移中，利用混合降解雜

2、質對照物質建立系統(tǒng)適用性試驗評價標準，對色譜系統(tǒng)的分離度和重現(xiàn)性進行評價的策略。
　　以β-內酰胺類抗生素為研究對象，利用混合雜質對照物質評價色譜系統(tǒng)的策略包括以下五個部分：第一，混合降解雜質對照物質的評價。首先確定混合雜質對照物質所要包含的目標雜質，然后根據(jù)目標雜質的來源，設計酸、堿、光、熱、氧化等強制降解實驗，在特定降解條件下獲得包含難分離物質對在內的目標雜質，制成混合雜質對照物質。最后對已經(jīng)制備得到的混合雜質對照物質進行分析

3、，評價其是否符合上述設計要求。第二，混合雜質對照物質中各雜質結構推測。利用柱切換LC-MS方法并結合頭孢菌素類抗生素及其雜質的質譜裂解規(guī)律對制備得到的混合雜質對照物質中的各雜質進行結構推測，明確每種雜質的來源和結構。第三，利用混合雜質對照物質建立系統(tǒng)適用性試驗評價標準。選擇適宜參數(shù)范圍內的12根色譜柱分別分析混合雜質對照物質，選擇保留時間合適且所有雜質都得到有效分離的色譜圖作為標準色譜圖，建立系統(tǒng)適用性試驗評價標準，并對每一個雜質進行定

4、位，設定理論塔板數(shù)、分離度、拖尾因子等檢測指標。第四，利用混合雜質對照物質評價色譜系統(tǒng)。針對不同實驗室間色譜柱選擇性的差異，利用固定相與流動相之間的互補性，調整流動相比例、pH值、柱溫、流速等因素，重現(xiàn)標準色譜圖。如果滿足系統(tǒng)適用性試驗要求，那么，該色譜系統(tǒng)便達到了分離控制雜質的目的，證明接收實驗室具有完成分析測試的能力。第五，采用試驗設計(Design of Experiment, DOE)理念優(yōu)化HPLC分析方法。在系統(tǒng)適用性試驗中