維生素E對鏈脲菌素所致胰島β細胞損傷的干預(yù)研究.pdf

1、目的：探討維生素E(vitamin E)對鏈脲菌素(streptozotocin，STZ)所致大鼠離體胰島β細胞損傷的保護途徑及可能的機制。 方法：1．分組：分離1-3日齡Wistar大鼠胰腺進行體外培養(yǎng)，培養(yǎng)細胞分為4組：①正常對照組：培養(yǎng)的胰島細胞不作任何干預(yù)處理；②維生素E組：培養(yǎng)液中僅加入終濃度為0.1mM的維生素E作用60分鐘；③STZ組：培養(yǎng)液中僅加入終濃度為2.2mM的STZ作用30分鐘；④保護組：Ⅰ-Ⅳ組。培養(yǎng)

2、液中分別加入0.0125mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM的維生素E預(yù)作用60分鐘后，再加入終濃度為2.2mM的STZ作用30分鐘。各組作用時間一到，離心棄上清液，再用新鮮培養(yǎng)液重懸細胞，繼續(xù)培養(yǎng)18小時后進行各項指標(biāo)檢測。2．檢測：放射免疫法檢測培養(yǎng)上清液中胰島素含量，分光光度計分別測量培養(yǎng)上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平，透射電鏡觀察細胞形態(tài)，Hoechest33258熒光染色觀察熒光強度，流式

3、細胞儀定量檢測細胞凋亡率，分光光度法測量胰島細胞特異性半胱氨酸酶-3(caspase-3)活性。 結(jié)果：與正常對照組比較，維生素E組胰島素含量、SOD活性、MDA水平、細胞凋亡率及caspase-3活性未見明顯變化(p>0.05)。單純STZ作用后，胰島素含量、SOD活性顯著降低，MDA水平、細胞凋亡率及caspase-3活性明顯升高，與正常對照組比較，p<0.05。同時，電鏡觀察到凋亡細胞，Hoechest33258熒光染色

4、發(fā)現(xiàn)發(fā)明亮淡藍色強熒光細胞數(shù)顯著增多。而在STZ作用前給予不同濃度維生素E作預(yù)處理的四個保護組，胰島素含量、SOD活性、MDA水平雖未恢復(fù)到正常對照組水平，但其下降或上升的程度較STZ組出現(xiàn)明顯抑制(p<0.05)。而且其抑制程度隨維生素E濃度的增大而增強(各保護組間比較p<0.05)，其中以終濃度為0.1mM的保護作用最強，呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性趨勢。在終濃度為0.1mM的維生素E保護組，細胞凋亡率、caspase-3活性分別為7.8