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1、近來發(fā)現(xiàn),內(nèi)源性阿片肽牛腎上腺髓質(zhì)22肽(Bovine adrenal medulla 22,BAM22)除了與μ-、δ-和κ-阿片受體結(jié)合之外,還能與感覺神經(jīng)元特異性受體(sensoryneuron-specific receptor,SNSR)結(jié)合。這些研究表明BAM22可能是一個重要的內(nèi)源性阿片肽。然而,BAM22在嚙齒類動物脊髓水平的分布至今仍不清楚。本實驗探討B(tài)AM22在大鼠脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root gan
2、glion,DRG)中的分布和細(xì)胞學(xué)定位。 方法:(1)采用大鼠一側(cè)后足掌皮下注射完全弗氏佐劑(Complete Freund`s adjuvant,CFA)建立炎性痛模型。將SD雄性大鼠(250-270 g)隨機分為對照組(saline組,n=6)和實驗組(CFA組,n=6)。運用免疫組化技術(shù)檢測了正常和CFA炎癥大鼠脊髓背角及DRG中BAM22的表達(dá)。同時用雙標(biāo)免疫組化方法對炎癥鼠的脊髓背角Fos和BAM22的共存關(guān)系進行
3、研究。 (2)對CFA炎癥大鼠鞘內(nèi)注射BAM22特異性抗體,分為對照組(saline組,n=7)和實驗組(BAM22抗體組,n=7)。觀察BAM22特異性抗體對CFA炎癥模型大鼠機械性刺激閾值的影響,探討內(nèi)源性BAM22在炎癥過程中的生理作用。 (3)對大鼠實施機械性背根切斷手術(shù),分為假手術(shù)組(n=5)和手術(shù)組(n=5)。運用免疫組化技術(shù)檢測了大鼠脊髓背角中BAM22的表達(dá)。 結(jié)果發(fā)現(xiàn): (1)B
4、AM22主要表達(dá)于大鼠脊髓背角淺層和DRG中; (2)BAM22主要存在于中、小型DRG神經(jīng)元中。19%DRG神經(jīng)元表達(dá)BAM22。 (3)切斷背根后,脊髓背角淺層BAM22的表達(dá)下降了85%。提示BAM22主要存在于初級傳入的中樞突,是由DRG神經(jīng)元合成而來。 (4)足底注射CFA產(chǎn)生外周炎癥后,BAM22在脊髓背角淺層和DRG神經(jīng)元中的表達(dá)均顯著性上調(diào),大約增加了2倍。 (5)雙標(biāo)結(jié)果表明:在
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